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如何提高外源基因的表达
如何
有效地
提高外源基因的表达
效率
答:
提高外源基因表达效率的途径有很多,
可以归纳如下:⑴提高启动子强度,⑵缩短启动子同克隆基因间距离 ⑶高效的翻译起始序列 ⑷高效的转录终止区
⑸提高质粒拷贝数及稳定性
⑹用以下方法提高翻译水平:
①调整SD序列与AUG间的距离
②用点突变的方法改变某些碱基③增加mRNA的稳定性的⑺减轻细胞的代谢负荷...
提高外源基因表达
效率的方法有哪些
答:
提高外源基因表达效率的途径有很多,
可以归纳如下:⑴提高启动子强度。⑵缩短启动子同克隆基因间距离。⑶高效的翻译起始序列
。
⑷高效的转录终止区
。
⑸提高质粒拷贝数及稳定性
。⑹用以下方法提高翻译水平:
①调整SD序列与AUG间的距离
;②用点突变的方法改变某些碱基;③增加mRNA的稳定性的。⑺减轻细胞的代谢...
在基因工程制药中要想
提高外源基因
在工程菌中
的表达
量应该从哪些方面考...
答:
从以下5个方面考虑1.优化发酵条件
,包括诱导时间这些因素.2.优化密码子(偏好密码子)3.换启动子4.换载体5.换宿主菌
如何提高
转基因动物中
外源基因的
整合率与
表达
率
答:
在显微镜下,使其具有携带外源基因的能力:
(1)核显微注射法
核显微注射法是动物转基因技术中最常用的方法。在母畜所生的后代中常用的动物转基因技术,然后将供体细胞细胞核移植到受体细胞——去核卵母细胞。 (2)精子介导的基因转移 精子介导的基因转移是把精子作适当处理后。(3)核移植转基因法 体细胞...
如何
有效地
提高外源基因
在大肠杆菌中
的表达
效率
答:
可从下列几个方面考虑:
1.优化发酵条件
,包括诱导时间这些因素.2.优化密码子(偏好密码子)3.换启动子 4.换载体 5.换宿主菌
如何
为
外源
高效降解菌提供良好条件,发挥生物强化作用
答:
④密码子组成。尽量避免使用罕用密码子如:AGG、AGA(Arg)、CUA(Leu)等。二、表达质粒的拷贝数和稳定性:多数情况下,目标基因的扩增程度同
基因表达
成正比,所以基因扩增为
提高外源基因的表达
水平提供了一个方便的方法。对于原核和酵母表达体系而言,选择 高拷贝数的质粒,以其为基础,组建表达载体。表达...
简述
外源基因
在大肠杆菌中高效
表达
的基本原理
答:
外源基因
在大肠杆菌中高效
表达
的基本原理,包括:强化蛋白质生物的合成(拷贝数、转录水平、mRNA 的翻译控制)、抑制蛋白质产物的降解、维持和恢复蛋白质特向异性空间构象三方面。将外源基因导入生物体的过程称为转化。这可以自然发生,也可以人为发生。人工转化转染方法包括:化学方法,有磷酸钙沉淀法、DEAE ...
如何提高外源基因
在大肠杆菌中
的表达
分子生物学
答:
首先 你要确定你酶切和连接都是正确的,这个就得自己摸条件了。其次 我建议二次转化,也就是首先选用DH5α或者Top10这类
的表达
扩增型感受态细胞转换一次,再用所得到的单克隆转入BL21这类的表达感受态细胞,这样可以有效的
提高表达
量。
如何提高外源基因
片段在原核细胞中
的表达
量
答:
构建载体的时候,考虑用具有强启动子的载体并且能够在大肠杆菌中
表达
重组蛋白的载体,比如pET系列的载体,转入的宿主菌要求是表达形的,比如BL21等。在表达过程中,注意摸索诱导剂IPTG的量、诱导时间及培养温度。多次摸索就可以找到一个最佳方案,因为蛋白表达是一个载体+宿主菌+培养条件的优化组合的选取。你...
增加基因
拷贝数可以
提高外源基因
在CHO细胞中
的表达
量?
答:
可行的,
增加基因
拷贝数可以
提高
其
表达
量。
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