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慢病毒介导的寄生虫基因沉默
什么是
慢病毒
答:
感染能力强,且免疫原性低,可有效感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、干细胞等多种类型的细胞,是
介导
外源基因表达的强大工具,可在体内外实现过表达、
基因沉默
、基因编辑等多种应用,具有广阔的应用前景。
一文读懂
慢病毒
(LV)| 什么是慢病毒?慢病毒载体的应用!
答:
慢病毒
(LVs)是一种特殊的病毒载体,它源自人免疫缺陷病毒(HIV-1)的改造,具有独特的优势。LVs的基因组为单股正链RNA,进入细胞后通过反转录和整合过程,将目的基因持久地插入宿主细胞基因组,无论细胞是否分裂。这种特性使得LVs在神经科学、
基因沉默
研究和光遗传学等领域展现出了广泛应用。在神经科学中...
慢病毒的
应用
答:
慢病毒
也被广泛地应用于表达RNAi的研究中。由于有些类型细胞脂质体转染效果差,转移到细胞内的siRNA半衰期短,体外合成siRNA对
基因
表达的抑制作用通常是短暂的,因而使其应用受到较大的限制。采用事先在体外构建能够表达siRNA的载体,然后转移到细胞内转录siRNA的策略,不但使脂质体有效转染的细胞种类增加,而...
一文读懂
慢病毒
(LV)| 什么是慢病毒?慢病毒载体的应用!
答:
慢病毒
(LV)载体是一种独特且高效
的基因
和RNAi导入工具,源于HIV-1病毒的改造。其基因组的单股正链RNA结构允许病毒在细胞内通过反转录形成DNA整合前复合体,最终稳定整合到宿主细胞基因组,产生持久的基因表达。LV载体特别适合非分裂细胞的感染,且免疫原性较低,减少了副作用。在神经科学领域,LV载体展现...
什么是
慢病毒
包装
答:
大量文献研究表明,
慢病毒载体介导的目的基因长期表达的组织或细胞包括脑、肝脏、肌肉、视网膜、造血干细胞、骨髓间充质干细胞、巨噬细胞等
。慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白,免疫原性低,在注射部位无细胞免疫反应,体液免疫反应也较低,不影响病毒载体的第2次注射。泉州指南针生物提供病毒包装(包括慢病毒...
使用shRNA比siRNA的优势是什么?
答:
siRNA
基因沉默
子进入培养细胞,可快速有效地短暂地降低靶基因的表达。使用嘌呤酶素选择 shRNA 或 shRNA
慢病毒
颗粒是一种达到稳定基因沉默的方法。因此,如果一个靶基因的蛋白转换较慢,shRNA 质粒或 shRNA 慢病毒颗粒应该是达到同样效果的理想选择。 本回答由提问者推荐 举报| 答案纠错 | 评论 20 5 ...
shrna能完全
沉默
目的
基因
么
答:
iRNA
基因沉默
子进入培养细胞,shRNA 质粒或 shRNA
慢病毒
颗粒应该是达到同样效果的理想。因此.,可快速有效地短暂地降低靶基因的表达。使用嘌呤酶素选择 shRNA 或 shRNA 慢病毒颗粒是一种达到稳定基因沉默的方法,如果一个靶基因的蛋白转换较慢.
使用shRNA比siRNA的优势是什么?
答:
两个在RNAi途径的
基因沉默
中具有实质利害关系的是双链小干扰RNA(siRNA)和基于载体的短发夹RNA(shRNA)。虽然siRNA和shRNA都可用于蛋白沉默,但它们的作用机制有所不同。不管是长的双链RNA还是短的约21bp碱基对的双链都能够直接被转运到组织培养的细胞中。虽然有一些报道提到siRNA在转染细胞时是被转运...
稳定细胞株构建
答:
结论是,稳定细胞株构建技术通过将外源基因整合到具有抗性的载体或利用
慢病毒
感染方法,实现基因的过表达、敲入、敲低等操作,构建出多克隆或单克隆的稳定表达细胞系。枢密在这一领域拥有丰富经验,主要应用在构建具有报告基因的细胞系、基因过表达、
基因沉默
以及基因编辑等服务中。具体步骤如下:1. 首先,...
RNA干扰-shRNA简单设计方法
答:
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种高效特异的基因缺失性研究工具,由Andrew Fire 和Craig Mello在线
虫
中发现的一种由双链RNA(dsRNA)
介导的基因沉默
现象,存在于所有真核生物中。RNAi已广泛应用于基因功能研究、药靶发现及药物筛选,具有治疗多种疾病的潜力。RNA干扰的作用机制是将双链RNA导入细胞,...
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