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未知序列目的基因获取方法
目的基因
的
获取方法
答:
3、用PCR技术扩增技术提取
。已知目的基因引物的序列,将整个DNA放入合成仪。只有引物中间的目的基因被大量扩增,即被提取出来。
要
获得未知序列
的
目的基因
可以从基因文库中寻找吗
答:
可以在NCBI找到
。这是权威官网,网页是英文的。
可以用软件DNAMAN编辑
。
全基因合成
有效
方法
答:
1. 反转录法:针对未知序列的大型基因
,此方法利用目的基因的mRNA作为模板,设计引物,通过反转录酶将mRNA转化为互补的DNA(cDNA),进一步在DNA聚合酶作用下形成双链cDNA,从而得到基因的DNA拷贝。2.
基因组扩增法
:通过基因组抽提试剂盒,可以直接从各种生物样本中提取基因组,然后设计特定引物进行PCR扩增...
【求助/交流】
未知序列
如何测得基因全长?如何从全长中筛选
目的基因
答:
可以用walking等方法扩增得到全基因序列
。得到序列后你就可以进行转化表达,分析功能了你的问题好笼统,一般情况是将你要做的东西,
丢到ncbi里面进行搜索,然后收集序列
,最好选择与你做的基因的来源亲缘关系近的物种,选择出来后在ncbi中进行blast进行比对,然后找到保守序列,设计简并引物,可以从 ... 主...
如何从
未知基因
组中克隆出新的
目的基因
答:
可以做个shot-gun,以酰胺酶蛋白序列作库搜索
,能搜到相关序列的话,再根据密码子偏好性推出其核苷酸序列,设计引物,以全基因组为模板,看能否得到部分序列去测序。
未知序列基因
分离的
方法
和具体步骤?要详细的
答:
1。反向PCR:其基本点是用适当内切酶裂解核心区外分子,使这些酶切片段自身连接形成环状分子,从而将边侧区域转化为内部区域。用与核心区末端同源的引物,但其3’端趋向
未知
区域,可以进步用PCR扩增中的未知区域。2.。接头PCR技术:接头PCR技术的原理为,首先设计一个长链接头和一个与之互补的短链接头,...
基因工程中如何
获取目的基因
答:
最后,把这些细菌中的这段DNA分离出来,再进行一系列的操作,就可以获得维生素B1合成酶基因。这种方法的缺点是专一性较差,分离出来的有时并非一个基因,但由于这种方法操作简便,所以现在仍然广泛采用。
反转录法
这种方法是在核糖体合成多肽的旺盛时期,首先把含有目的基因的mRNA的多聚核糖体提取出来,分离...
怎样
获取
一个植物的
未知
DNA
序列
?
答:
将植物的部分组织进行匀浆,抽提DNA。跑一下琼脂糖凝胶电泳。检验一下是否提到DNA。然后用PCR进行扩增,这里你要查询一下你所需要的引物。在一些文献里会有你所需要的引物,如果没有就需要自己设计引物。扩增完再跑一下胶,看扩增的情况。然后跑DGGE,然后割胶,进行纯化。纯化完成后进行克隆。最后就可以...
求助,怎么克隆一段
未知序列
的
基因
答:
如果时间允许就先分离纯化该酶蛋白,然后作质谱分析其C端和N端
序列
,然后据此设计引物,克隆分析。 (转载,仅供参考)
克隆一个
未知
的
基因
拿到
序列
需要多久?
答:
1 分析
序列
,设计简并引物,送公司合成引物需要等4-5天。等的过程中提取RNA和反转录时间足够了。2 引物合成送到后,使用制备好的脑 cDNA模板利用简并引物进行PCR,然后电泳检测,这个阶段紧凑的话1-2天。3 如果成功克隆出了
目的
条带,那么就要回收,做TA克隆,然后测序。简并引物克隆出的条带貌似不...
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