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目的基因的筛选方法有哪些
从突变基因文库中
筛选目的基因的
高通量筛选技术有多种,常用的有...
答:
从突变基因文库中筛选目的基因的高通量筛选技术有多种,
常用的有平板筛选法、噬菌体展示法、 荧光筛选法、
;酵母细胞表面展示法等。
如何从基因文库中
筛选目的基因
答:
有3种
方法
:核酸杂交法、PCR
筛选
法、免疫筛选法
如何进行
目的基因
和目的的cDNA
的筛选
?
答:
直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”
。这种方法有如用猎枪发射的散弹打鸟,无论哪一颗弹粒击中目标,都能把鸟打下来。鸟枪法的具体做法是:用限制酶(即限制性内切酶)将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,让供体细胞...
利用基因工程技术进行药物的研制与开发时,
目的基因的
鉴定
方法有哪些
?其...
答:
利用特定抗体与目的基因表达产物特异性结合的作用进行筛选
。此法不是直接筛选目的基因,而是通过与基因表达产物的反应指示含有目的基因的转化细胞,因而要求实验设计要使目的基因进入受体细胞后能够表达出其编码产物。抗体可用特定的酶常用过氧化物酶、碱性磷酸酶等标记,结合酶标抗体处,酶可催化特定的底物分解...
如何从基因文库中
筛选
出
目的基因
视频时间 05:23
如何从基因文库中
筛选目的基因
答:
大致步骤是:1.从供体中制备高纯度的染色体基因组dna;2.用合适的限制酶把dna切割成若干个片段;3.将这些片段分别与适当的载体分子进行体外连接;4.重组载体导入受体细胞中或包装成噬菌体,适宜条件下培养;5.观察培养基中的重组菌落或噬菌斑,
筛选
阳性克隆,再将其克隆中的
目的基因
提取分离出来即可。
目的基因的
鉴定
方法有哪些
答:
基因的
鉴定
方法
:间接识别法 在基因的间接识别法(Extrinsic Approach)中,人们利用已知的mRNA或蛋白质序列为线索在DNA序列中搜寻所对应的片段。由给定的mRNA序列确定唯一的作为转录源的DNA序列;而由给定的蛋白质序列,也可以由密码子反转确定一族可能的DNA序列。因此,在线索的提示下搜寻工作相对较为容易,...
直接选择法的特点是直接测定
基因
表型,具体
包括哪些
答:
【答案】:直接选择法是针对载体携带某种或某些标志基因和
目的基因
而设计
的筛选方法
,其特点是直接测定基因表型。具体
包括
:①抗生素抗性筛选。如果克隆载体携带有某种抗药性标志基因,则只有含这种抗药
基因的
转化子细菌才能在含该抗菌药物的培养板上幸存并形成菌落。②营养缺陷筛选。若克隆的基因能够在宿主菌...
如果质粒与目的基因结合的重组DNA和不含
目的基因的
质粒,同时在培养基...
答:
一般有两种
方法
,一是用
目的基因的
特异性引物以重组质粒为模板,进行PCR扩增。看能否出现目的基因的扩增产物。还有一种是将纯化的质粒进行酶切,因为目的基因连接到载体质粒上时两边都带有人工添加的酶切位点,只要用这些内切酶进行酶切,然后看能否有目的基因的片段被切下来,则可以判定目的基因有没有插入...
采用质粒载体克隆
目的基因
,请问如何准确
筛选
出带有目
答:
如果是做
基因
克隆的话,可以直接用蓝(兰)白斑
筛选
.一般的克隆载体上有Lac Z基因,在IPTG和X-gal作用下能产生蓝斑,而此基因中间有多克隆位点,当你的片段基因插入时,把这个基因给破坏了,不能产生兰斑,而只是产生白斑.这样就区别开来,象PUC18/19,PBR322等最常用的质粒都有Lac Z基因.对载体的要求:①...
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