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DNA琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳
中
dna
的影响迁移速度有哪些
答:
琼脂糖凝胶电泳
中
dna
的影响迁移速度:1、
DNA
的分子大小及构型不同构型DNA的移动速度次序为:供价闭环DNA(covalently closed circular,cccDNA)>直线DNA>开环的双链环状DNA.线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中蠕行。因...
琼脂糖凝胶电泳
跑的
DNA
为什么会拖尾
答:
由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。对策:减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶;减少dNTP的浓度;适当降低Mg2+浓度;增加模板量,减少引物的用量,减少循环次数,提高退火温度。
琼脂糖
的熔点在62〜65°C之间,融...
琼脂糖凝胶电泳
的原理
答:
琼脂糖凝胶电泳
的原理:琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大。琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。原理基于
DNA
分子在电场中的迁移率不同。...
琼脂糖凝胶电泳dna
条带不够均匀的结果有哪些
答:
琼脂糖凝胶电泳DNA
条带不够均匀的结果可能有以下几种原因:1. DNA样品浓度不均匀:如果在电泳前未对DNA样品进行浓度调整,或者混合物中的DNA样品浓度不同,就会导致电泳结果中的DNA条带出现不均匀。这可能是由于DNA提取或PCR扩增过程中的失败或误差导致的。2. DNA降解:DNA在制备和储存过程中容易受到酶...
琼脂糖凝胶电泳
的原理是什么?
答:
琼脂糖凝胶电泳
是以琼脂糖为介质,对不同大小的
DNA
或 RNA 实现分离的一种电泳方法。琼脂糖是一种多糖,具有亲水性,但是不带电荷。使得 DNA 在碱性条件下使其带负电荷(pH8.0 的缓冲液),在电流作用下,以琼脂糖凝胶为介质,由负极向正极移动,根据不同的 DNA 分子片段的大小和形状不同,在电场...
琼脂糖电泳DNA
迁移速度是如何排序的?
答:
质粒
DNA琼脂糖凝胶电泳
中质粒超螺旋、开环、直链跑胶快慢次序依次是超螺旋、直链、开环。琼脂糖凝胶电泳DNA 迁移速率与分子大小和构象相关,分子构象越大,摩擦阻力越大,第一条带是超螺旋带应该最亮,因为超螺旋结构完整紧密,跑得最快。第二条带为直链线性质粒是双链都断开变成松弛的线性DNA,不如...
琼脂糖凝胶电泳
时胶中
dna
是靠什么发出荧光的
答:
琼脂糖凝胶电泳
时胶中
dna
是靠荧光染色剂溴化乙锭发出荧光的。溴化乙锭为一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的
DNA
。溴化乙锭用标准302nm紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid底片或带CCD成像头的凝胶成像处理系统拍摄。溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面...
琼脂糖凝胶电泳
检测pcr产物的原理
答:
琼脂糖凝胶电泳
检测PCR产物的原理是通过将PCR产物放入琼脂糖凝胶中,并施加电场,使得
DNA
分子根据大小不同在凝胶中移动,从而实现分离和检测PCR产物的目的。琼脂糖凝胶电泳是一种常用的PCR产物检测技术,具有分辨率高、操作简便、成本低廉等优点。其原理是基于DNA分子在电场中的迁移速率与分子大小成反比的原理...
琼脂糖凝胶电泳
注意事项
答:
注意事项如下:一、缓冲系统:在没有离子存在时,电导率最小,
DNA
不迁移,或迁移极慢,在高离子强度的缓冲液中,电导很高并产热,可能导致DNA变性,因此应注意缓冲液的使用是否正确。长时间高压
电泳
时,常更新缓冲液或在两槽间进行缓冲液的循环是可取的。二、
琼脂糖
:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其...
琼脂糖凝胶电泳
跑完,
DNA
条带颜色浅怎么回事?
答:
1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。2 、琼脂糖检测
DNA
一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度。3、可能是原液浓度太大造成的。4、可能DNA已降解。原理
琼脂糖凝胶电泳
的...
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