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基因工程基本内容筛选
基因工程
中常用-互补来
筛选
重组质粒,请说明其原理。
答:
【答案】:很多载体都携带一段细菌
的
lacZ
基因
,它编码β-半乳糖苷酶N-端的146个氨基酸,称为α-肽,载体转化的宿主细胞为lacZ△15基因型,它表达β-半乳糖苷酶的C-端肽链,当载体与宿主细胞同时表达两个片段时,宿主细胞才有β-半乳糖苷酶活性,使特异的底物X-gal变为蓝色化合物,这就是所谓的α...
基因工程的
操作步骤:①制备重组dna分子,②转化受体细胞,③
筛选
出获得...
答:
基因工程的基本
操作步骤
主要
包括四步:1、目的基因的获取,即④;2、基因表达载体的构建,即①制备重组DNA分子,使目的基因与运载体结合;3、将目的基因导入受体细胞,即②转化受体细胞;4、目的基因的检测与表达,即③
筛选
出获得目的基因的受体细胞、培养受体细胞并诱导目的基因的表达,检测目的基因的表达...
基因工程
中蓝白斑
筛选的
原理是什么
答:
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子
的筛选
,称为蓝白斑筛选。
基因工程
包括哪几步
答:
3)将载体导入受体细胞:这一步即为转化,将连接产物与感受态细胞混合,冰浴后热休克,再放冰上几分钟,加入LB或soc等培养基复苏,最后将菌体涂布到含有载体上的抗性的抗生素平板上。最后通过蓝白斑
筛选
等方法选择出成功导入目的
基因的
受体细胞。4)目的基因的检测与表达 :根据实验的目的,设计合适的方法...
基因工程
中,为何要进行重组体
的筛选
答:
基因工程
中你希望得到的是具有效应的蛋白质,需要将带有目的基因的载体转入受体细胞,如果不
筛选
,不具目的基因
的
载体进入受体细胞后你去培养他就造成了资源浪费
基因工程
中
筛选
和目的基因
的
坚定与选择一样吗
答:
当然不一样
谁帮我想想对于基因诊断
基因筛选
,
基因工程的
看法
答:
先定义一下 基因工程:狭义
的基因工程
仅指用体外重组DNA技术去获得新的重组基因;广义的基因工程则指按人们意愿设计,通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性。基因诊断:通过分子生物学和分子遗传学的技术,直接检测出分子结构水平和表达水平是否异常,从而对疾病做出判断。
基因筛选
:和基因诊断差不多,选...
基因工程的
过程是怎样操作的?
答:
切是在体外将DNA进行切割,使之片段化或线性化;连是在体外将不同来源的DNA分子重新连接起来,构建重组DNA分子;转是将重组连接的DNA分子通过一定的方法重新送入细胞中进行扩增和表达;选是从转化的群体中将所需要的目的克隆挑选出来;鉴就是对
筛选
出来的重组体进行鉴定。图4-1:
基因工程的
操作过程 ...
基因工程的
步骤,具体一点
答:
基本的基因工程
技术步骤简单来说五个字:切、接、转、增、检。“切”就是将加入酶切位点的外源基因和拥有相同酶切位点的载体进行限制性内切酶酶切反应,克隆质粒可以单酶切也可以双酶切,要是做表达质粒就需要双酶切以确定正确的基因表达方向;“接”就是将前面用内切酶处理后有着相同粘性末端的外源...
在
基因工程
中,用青霉素,四环素
筛选的
原理是什么?
答:
青霉素可以抑制革兰氏阳性菌(多数细菌)细胞壁肽桥生成,从而抑制细菌繁殖;四环素可以抑制细菌蛋白质合成(似乎是抑制转录)抑制细菌繁殖。故没有抗生素抗性
基因的
细菌无法生存下来,即可
筛选
出有抗性基因的细菌(导入质粒)的细菌,再通过其它手段如显色法选出质-目载体 ...
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