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外源基因的表达
怎么样用分子生物技术手段证明
外源基因
是被整合和
表达
的
答:
Western 印迹杂交证明外源基因在植物细胞内成功地转录及翻译,生成特异的蛋白质;证明外源基因在植物细胞内成功地转录及翻译,生成特异的蛋白质; 第三步是进行性状鉴定及
外源基因的表达
调控研究进行性状鉴定及外源基因的表达调控研究;最后是遗传学分析,证明转基因的遗传稳定性,并获得转基因植物品种,并应用...
微生物
表达外源基因
需要注意什么
答:
表达的外源基因
是什么,对宿主细胞是不是有害,会不会形成包涵体,产物是存在于细胞内还是分泌到细胞外,总之要注意选择好合适的宿主(涉及到真核生物的蛋白,你要考虑翻译后修饰问题,这个时候再用大肠杆菌就不合适了),产物合适的分离方法和菌的最佳培养条件等。
如何将
外源基因
导入植物细胞并
表达
答:
根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中。因此,农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现
外源基因
向植物细胞的转移与整合,然后通过细胞和...
为什么
外源基因
在酵母中用整合方式
表达
答:
一楼说的对,就是简略了点。采用整合方式
表达
就是
外源基因
随染色体复制进行整合型表达,稳定性高,不会随酵母的增殖而丢失;反之,如果是酵母染色体之外的质粒,就很可能会随着酵母的复制而逐渐丢失了。
微生物细胞
表达外源基因
需要具备的条件和原因
答:
一般有以下几个条件 1.菌株,一般是
基因
改造过的菌株,除去了蛋白酶相关基因,为了防止目的蛋白的降解,如常用
的表达
菌株BL21等等。2.载体,主要是运载目的基因到宿主体内,并在细菌中稳定遗传和表达;一般有pET系列,pGEX以及pMC等等,很多很多;根据你需要的不同标签,选择不同的载体。一般就这些了吧 ...
外源基因
和自然界的基因结构有何异同
答:
二、含义不同:
外源基因
是自然界中存在的基因。人工转基因现代技术应用很多,转基因大大豆,水稻等,主要是:将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中,由于导入
基因的表达
,引起生物体的性状的可遗传的修饰。重组过程 二阶体中的两条染色单体在相应的位点发生断裂,断裂的两端成“十”字形重接,...
外源基因
在大肠杆菌中的诱导
表达
和检测的结果如何分析
答:
SDS-PAGE电泳后,观察空质粒和
外源基因的
重组质粒在大肠杆菌中诱导
表达
后产生的蛋白带的差异,然后可以转膜后用外源基因所编码蛋白的单克隆抗体做Western-blot鉴定即可。
转基因生物一定能
表达
出
外源基因的
遗传信息吗?
答:
不一定,因为目前的技术还不能非常精确的控制外源基因在宿主染色体上的插入点,也就是说如果外源基因插入到宿主基因组的非编码区,调控区域等,就难以
表达
出
外源基因的
遗传信息。另外,外源基因本身也易被宿主基因组修饰与限制而造成外源基因的失活与沉默。
怎么鉴别
外源基因
和内源
基因的表达
答:
将带His标签的目的基因转染细胞后,用His抗体进行免疫印迹实验,请问:1)此时得到的蛋白表达水平仅为
外源基因
(即转入的基因)
的表达
吗?2)如果用目的基因蛋白抗体进行免疫印迹实验,得到的蛋白表达水平是否应为外源基因和内源
基因表达
之和;3)如果有两个不同的基因都标记上同样的标签(如His), 共转染...
重组菌当中的
外源基因
是否
表达
可以通过几个层面进行分析
答:
外源基因的表达
与检测 9 超声处理5分钟,每30秒间隔50秒,12000rpm离心10分钟,取上清作为蛋白样品。10 渠5ul测定蛋白浓度。11 取50ug蛋白上样,加入5ul上样缓冲液,沸水浴5分钟,瞬时离心后上样。12 170V恒压电泳至溴酚蓝至凝胶前沿。13 染色1小时 14 脱色至条带清晰,背景明亮为止。结果: ...
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