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如何筛选重组质粒
一文解读:
质粒
载体及各个组成元件
答:
质粒
存在
重组
DNA所需的某些区域,如复制起点(origin of replication)。质粒在尺寸上相比于基因组是很小的,它们相对来说更加易于研究和改造。
如何
阅读一个完整的质粒图谱?首先看质粒图谱包含的4大要素:1. 复制起点(ori):控制着质粒的复制,并决定了质粒的宿主属性和拷贝数;2.
筛选
标记:多为抗性基因...
重组质粒
转染大肠杆菌,
筛选
时为什么培养基不长菌
答:
应该选择培养基 选择培养基指根据某种微物特殊营养要求或其某化、物理素抗性设计培养基其功能使混合菌劣势菌变优势菌提高该菌
筛选
效率
质粒载体和
重组质粒
的区别
答:
质粒载体 即,在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因,以质粒为载体,将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞,进行重组、
筛选
、扩增的过程。
重组质粒
有目的基因,有质粒,然后用酶使两者相接就是重组质粒,重组质粒是一个种动作,方法,也是一个名词。简单地说,重组质粒包括...
质粒
上的标记基因不可用来
筛选
含
重组
DNA的细胞和转基因动、植物?_百 ...
答:
筛选
标记基因有两个含义,一个是对菌用,目的是筛选出阳性的工程菌,这一基因是不会插入靶细胞(即动植物细胞等)DNA序列的。第二个则是存在于T-DNA区域,将会插入靶细胞DNA序列的,这类标记基因就是用来做筛选用。例如常见的kan(卡那霉素)抗性。试想如果不能筛选,那
怎么
将插入成功的细胞从一堆...
生物基因工程问题
答:
(1)要把目的基因切下来,就得两端都切一下,用“酶II"切
质粒
的时候,如果用酶II之后连接进去,目的基因可能会连进多个位点。而且还会出现一大堆复杂的现象,这个先不说。所以切质粒只能用"酶I"(2)要插入载体,自然要用到“连接酶”了 (3)标记基因的作用就是“便于
筛选
”(4)结构基础是“...
重组质粒
除了目的基因
答:
(1)过程①是基因表达载体的构建,需要使用限制酶和DNA连接酶,基因表达载体上含有目的基因、启动子、终止子和标记基因.(2)氨苄青霉素抗性基因使受体细胞具有抵抗氨苄青霉素的特性,因此,可以用含有氨苄青霉素的培养基来培养棉花细胞,在该培养基上能生长的细胞即含有
重组质粒
.(3)将目的基因导入植物...
蓝白斑
筛选
的简介
答:
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征
筛选重组
子,如a-互补 、抗生素基因等。蓝白斑筛选是在指示培养基上,
重组质粒
的菌落是白色的,非重组质粒的菌落是蓝色的,以颜色不同为依据直接筛选重组克隆的方法 。
人工构建的大肠杆菌
质粒
pBR322是基因工程中应用最广泛的载体(见图1...
答:
(1)质粒是双链环状DNA分子;该质粒含有多种限制性核酸内切酶的酶切位点,可以作为多种目的基因的载体.ampr和tetr在基因工程中作为标记基因,用于
筛选重组质粒
.(2)①通过基因工程培育能合成人胰岛素的工程菌时,可先依据氨基酸的排列顺序推出信使RNA的碱基序列,再推出DNA(基因)的碱基序列,然后用...
求助,生物技术制药论文,关于一种基因工程药物的研制方案,包括它的制备...
答:
e.pUC18还携带了氨卞青霉素抗性基因,可
筛选重组质粒
。lactose(4-D-glucose--galactopyranoside) and allolactose以大肠杆菌为宿主菌进行基因的克隆将目的基因克隆到大肠杆菌细胞中的操作步骤:a.获得目的基因和质粒载体;b.形成重组质粒;c.制备感受态细胞,用重组质粒转化大肠杆菌细胞;d.培养大肠杆菌,让重组质粒及外源...
如何
快速了解接触的
质粒
(四)
答:
pUC19
质粒
图谱 pcDNA 3.1(+)质粒图谱 上面质粒图谱中圈出的AmpR,NeoR/KanR等表示质粒中抗性
筛选
标签,方便后面筛选出阳性克隆(
重组
成功的阳性质粒;自连的假阳性质粒需要后续质粒测序验证)。抗性基因可以参考用来区分质粒的种类,像复制起点一样,质粒中有两个复制起点一般为穿梭质粒;类似的质粒...
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