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核酸杂交法筛选目的基因
基因探针是如何制备的?在未知该
目的基因
的序列时。
答:
基因
探针是指能与特定核苷酸序列发生特异互补
杂交
,杂交后又能被特殊
方法
检测的已知被标记的核苷酸链。探针根据来源与性质不同已分为基因组DNA探针、cDNA探针、RNA探针、cRNA探针和人工合成的寡核苷酸探针等5类。来源可以是pcr扩增而来,或反转录而来,或人工合成等等,再加上标记物,比如同位素、地高辛、...
PCR的原理
答:
提取的
核酸
即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便
的方法
溶解细胞,裂解病原体,消化除去染色体的蛋白质使
靶基因
游离,直接 用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法,要防止RNase降解RNA。 Mg2+浓度 Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/...
基因
分型为什么要去除具有亲缘关系的样本
答:
(四)PCR-ELISA法本法避免了电泳和
杂交
的步骤,适于常规ELISA记数仪检测。因为5'端修饰后仍可进行常规PCR扩增特异
靶
序列。因此,可以通过修饰一个引物的5′端使其携带便于PCR产物固定的功能
基因
,而通过另一引物5′-端的修饰使产物便于检测。 已赞过 已踩过< 你对这个回答的评价是? 评论 收起 ...
什么是逆转录
答:
逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。此过程中,
核酸
合成与转录(DNA到RNA)过程与遗传信息的流动方向(RNA到DNA)相反,故称为逆转录。逆转录过程是病毒的复制形式之一,如RNA病毒中的逆转录病毒,DNA病毒中的嗜肝DNA病毒和花椰菜花叶病病毒的复制均需要...
为什么利用DNA技术可以有
目的
地改造原有的菌种并且提高其产量_百度知 ...
答:
主要取决于
基因
的来源、基因本身的性质和该项遗传工程的
目的
。 重组DNA片段的取得 主要
的方法
有:①利用限制酶取得具有粘性末端或平整末端的DNA片段;②用机械方法剪切取得具有平整末端的DNA片段,例如用超声波断裂双链DNA分子;③经反向转录酶的作用从mRNA获得与mRNA顺序互补的DNA单链,然后再复制形成双链DNA(cDNA)。
转
基因
技术中的基因整合问题
答:
受体细胞中的DNA是没有和
目的基因
刚好嵌合的D... 不通过运载子导入的转基因技术(如基因枪法 显微注射法等)中(这是重点) 目的基因在导入受体细胞内后 是怎么整合到受体细胞的基因组中的?受体细胞中的DNA是没有和目的基因刚好嵌合的DNA断面的吧?如果用限制性
核酸
内切酶的话 受体细胞中的DNA不就被完全破坏不能用...
建立
基因
文库的
目的
答:
抑制性消减
杂交
技术 (Suppression Subtractive Hybridization,SSH) 是 DIATCHENKO 等人于1996年依据消减杂交和抑制 PCR 发展出来的一种分离差异表达
基因
的新
方法
,主要用于分离两种细胞或两种组织的细胞中的差异表达基因。它主要是利用抑制 PCR 对差减杂交后丰度一致的
目的
材料中两端连有不同接头的差异表达片段进行指数扩增,...
生物作业,急求帮助
答:
(2)
方法
:主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径 4.
目的基因
的检测和表达 (四)基因工程的成果与发展 1.与医药卫生 (1)生产基因工程药品 ①优点:高质量、低成本 ②举例:胰岛素、干扰素、乙肝疫苗等60多种 (2)基因诊断 ①含义:用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子做探针,利用DNA分子
杂
...
酵母单
杂交方法
分析转录激活活性的原理和过程
答:
再将文库质粒转化入报告株;若存在文库蛋白与
目的基因
的相互作用,可通过对报告基因的表达将文库蛋白的
基因筛选
出来.2 酵母单
杂交
技术的应用 酵母单杂交技术是建立在许多真核转录因子在结构和功能上是由独立的DNA结合结构域和DNA激活结构域组成的基础上,这使得研究者可以构建不同的基因融合体,在酵母中表达...
筛选杂交
瘤细胞的选择培养基原理
答:
正常的脾细胞在培养基中存活仅5-7天,无需特别
筛选
,细胞多聚体也容易死去,关键问题是要去除未融合的瘤细胞.选择培养基具有3种关键成分:次黄嘌呤(hypoxanthine)、氨甲蝶呤(aminopterin)和胸腺嘧啶核苷(thymidine),故名HAT培养基.这个培养基通过抑制瘤细胞的核苷酸合成,达到去除未融合瘤细胞的
目的
.细...
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