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目的基因的筛选与获取方法
已知一个物种的基因组,怎么克隆
目的基因
答:
1.原位杂交法:这一种利用特异探针的直接选择法,是一种十分灵敏而且快速的
方法
,用于杂交的探针可以是双链DNA,也可以是单链DNA,或是RNA。杂交的检测常用放射性同位素标记探针,通过自显影来进行。显然,有效进行杂交
筛选
的关键是获得特异的探针。探针
的获得
有如下方法:①如果
目的基因
序列是已知的,或...
如何
筛选
出含有
目的基因的
受体细胞,举
答:
利用基因表达载体上的标记
基因筛选
:例如:标记基因是四环素抗性基因,就用含有四环素的培养基培养活细胞,如果细胞活着,证明基因表达载体已经进入。不存活,表明没有进入受体细胞。
高中生物中,标记基因
和目的基因
是连在一起的吗?如何用标记
基因筛选
目的...
答:
终止子和复制原点的 如果载有
目的基因的
运载体没有成功的进入宿主细胞的话 你在最后检测的时候 你的宿主细胞就不会被检测到有目的基因嵌入到该细胞的DNA上的迹象 这也正是标记基因的作用。用标记
基因筛选
目的基因载体 是你选择什么样的标记基因 就好像是说如果你的标记基因是抗青霉素的标记基因 那你在...
如何把导入了
目的基因的
受体细胞
筛选
出来?
答:
导入时用的运载体上如果有抗性基因(标记基因),就可以通过检测抗性
基因的
表达来检测,比如运载体PBR322 就带有抗四环素基因和抗氨卞青霉素基因 要么就等
目的基因
在受体细胞中表达以后,然后根据特定的性状来区分
在生物基因工程这一节中,导入
目的基因
后,为什么常需要进行
筛选
答:
不同的限制性内切酶识别并切割的序列是不同的,也就是两种酶分别切割了
基因和
载体时,产生了两个切口,这两个切口不是粘性末端,不能互补配对,所以不可能连接在一起,如果用一种酶来切那么这样基因中或者是载体上就会有相同的粘性末端,这样基因本身除了切下来的那段之外,剩下的部分在连接酶作用下相同的粘性...
在基因工程中如果
目的基因
取代抗性基因那怎么样鉴别与选择呢?_百度知 ...
答:
当
目的基因
取代某一抗性
基因的
时候,科学家一定会考虑在该重组DNA上还会有另一抗性基因。假设目的基因导入了抗四环素基因,那么我们可以利用质粒上另一端的抗青霉素基因,首先,用青霉素
筛选
,然后培养成单菌落,用滤纸影印的
方法
。即将不同菌落中的菌分离出来并放在四环素培养基中和普通培养基中再进行筛选...
农杆菌转化法的步骤
答:
1、农杆菌培养至适当浓度。2、受体材料消毒处理并切成适当大小组织块。3、组织块浸泡于菌液中适当的时间。4、浸泡过的组织块放于共培养基上培养。5、组织块转移到
筛选
培养基上培养,选出阳性幼苗。检测
方法
根据实验
目的
不同而不同。可以用PCR扩增目的片段;如果有报告
基因
GUS、GFP等也可以进行染色或荧光...
请问 标志基因为什么能
筛选目的基因
已注入受体细胞的细胞,过程是怎样的...
答:
标志基因一般是某种药物的抗性基因,如抗青霉素基因等。
筛选
时向培养基内加入该抗性基因抗的物质,则
目的基因
已注入受体细胞的细胞表达该抗性基因,不会死亡,而为注入
基因的
细胞则因为药物而死。
抑制性扣除杂交技术
筛选目的基因
有哪些原理?
答:
抑制性扣除(消减)杂交(suppression:subtractive:hybridization,SSH)是抑制性PCR与消减杂交技术相结合的更简单、更快速的分离差异
基因的方法
。该方法运用了杂交二级动力学原理,即高丰度的单链DNA在退火时产生同源杂交的速度快于低丰度的单链DNA,从而使原来在丰度上有差别的单链DNA相对含量达到基本一致,...
...需要从受体细胞群中
筛选
出已
获得目的基因的
细胞,图1中①-③示一...
答:
而
获取目的基因和
重组质粒所用限制酶应保持一致故答案为:(1)限制酶和DNA连接酶;(2)重组质粒和未重组质粒;(3)含有重组质粒的细菌和导入不成功的细菌;(4)将存活的细菌转入含氨卡青霉素的培养基中培养;(5);(6)XbaⅠ和BclⅠXbaⅠ和BclⅠ ...
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