第2个回答 2019-10-22
盐析：当盐浓度增高到一定值时，蛋白质的溶解度逐渐下降，直至蛋白质析出。
1)
盐的选择
蛋白质沉淀时，常用（NH4)2SO4
优点：溶解度大，且对温度不敏感；分级效果好；有稳定蛋白质结构的作用；价廉，废液可作肥料。
缺点：沉淀后样品需脱盐。
2)
（NH4)2SO4盐析
固体法：搅拌下，少量多次加入
饱和溶液法:在蛋白质溶液中加入预先调好pH的（NH4)2SO4溶液。
透析法:将盛蛋白质溶液的透析袋放入一定浓度的（NH4)2SO4溶液中，通过透析作用改变蛋白质溶液中的盐浓度。使用于小体积样品。
影响盐析的因素:
A、盐析常数Ks的影响：
Cohn方程式：lgS=β－Ks×M
Ks：盐析常数，与T、pH有关，与蛋白质及盐的种类有关
Ks越大－－△S变化大－－盐析效果好
B、pH的影响
C、蛋白质纯度和浓度的影响
D、其他因素的影响：
金属离子：加EDTA－Na2溶液
脱盐:
透析方法：
搅拌下，3hr平衡，样品液：透析液＝1:10；
或静止，过夜，样品液：透析液＝1:20。
检查：脱（NH4)2SO4
：用10%BaCl2检查
脱NaCl
：用10%AgNO3检查