RNA是如何反转录成cDNA的？过程和原理怎样？请教

我做反转录的操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水，65C反应10min,冰上放置5min后，再加dNTP，RNaseA，BUFFER, MTV逆转录酶，反应25℃10min，37℃60min，70℃10min。我想请教每一步的原理，为什么这么做？

举报该问题

其他回答

第1个回答 2011-04-07

操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水
65C反应10min,冰上放置5min后：这一步是让RNA变性，把RNA的二级结构打开；
再加dNTP，RNaseA，BUFFER, MTV逆转录酶，
反应25℃10min：这一步是让反转录引物（oligodT，随机引物）和模板RNA退火结合
37℃60min：这一步是反转录酶的工作温度
70℃10min：这一步是变性，把合成的cDNA和RNA变性开，就拿到单链的cDNA本回答被网友采纳

相似回答

RNA病毒的RNA如何逆转录成cDNA答：1. 逆转录是一种生物化学过程，它允许RNA病毒的遗传信息被转换成互补的DNA（cDNA）。2. 这一过程对于RNA病毒来说是复制其遗传物质的关键步骤，并且它依赖于逆转录酶（也称为依赖RNA的DNA聚合酶，RDDP）的活性。3. 逆转录酶催化下，RNA病毒RNA的信息被用来合成一条与原始RNA互补的cDNA单链。4. 在...

rna能转录出单链cDNA吗?答：RNA可以反转录成单链cDNA，随后通过特定的生物学过程形成双链cDNA。cDNA是由与RNA链互补的单链DNA构成的，这种单链DNA是在RNA模板和适当引物的存在下，通过反转录酶的作用合成的。合成后的单链cDNA经过RNA酶处理去除对应的RNA后，再通过DNA聚合酶的作用形成双链cDNA。反转录在生物学上有重要意义：1. ...

pcr技术的基本原理和过程答：pcr技术的基本原理和过程如下：qRT-PCR（定量逆转录聚合酶链式反应）是利用逆转录酶将RNA模板转录为cDNA，再使用Taqman探针或SYBRGreen等荧光染料检测cDNA的定量过程。以下是关于qRT-PCR原理的更加详细介绍。首先，RNA模板经过逆转录反应转化为cDNA，其中需要引物与逆转录酶配合作用，以产生目标序列所需的反向...

大家正在搜

mrna反转录成cDNA的过程 mrna反转录形成cdna的过程反转录过程需要的酶都有什么反转录和逆转录有什么区别 RNA反转录的步骤 mrna反转录过程反转录的原料逆转录反转录反转录原理