毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KlFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关．获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程

Question

毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KlFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关．获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图．（1）过程①构建的重组表达载体除具有KlFⅡ基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等．其中标记基因的作用是______．（2）在过程②中，用______处理能将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞．在培养过程中，需将成纤维细胞置于pH值约为______培养液中，并且放在含95%的空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养．（3）在过程③中，卵母细胞除可从活体输卵管中采集外．还可以从已宰杀的母羊______中获取；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，同时用微型吸管吸走______．

Answer 1

（1）重组表达载体应包括：目的基因、启动子、终止子以及标记基因等，其中标记基因是用来鉴别受体细胞是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来的．
（2）动物细胞培养过程可用胰蛋自酶或胶原蛋自酶处理，培养条件为PH大约 7.2-7.4、5%的CO₂的混合空气．
（3）卵母细胞可从活体输卵管、已宰杀的母羊卵巢中采集；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理的同时用微型吸管吸走第一极体，防止干扰．
故答案为：
（1）鉴别受体细胞是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来
（2）胰蛋白酶或胶原蛋白酶  7.2-7.4
（3）卵巢   第一极体