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举例说明常用的报告基因
报告基因列举
几种
常见的报告基因
答:
β半乳糖苷酶是另一种常用报告基因
,编码于大肠杆菌的lacZ基因,其易于通过免疫组织化学观察。使用ONPG或CPRG底物检测其酶活性,ONPG灵敏度较低,而CPRG更高。
荧光素酶
,如细菌荧光素酶、萤火虫荧光素酶和Renilla荧光素酶,因其非放射性和高效性,尤其适合哺乳细胞研究。Promega的pGL3载体提供了分析转录活性...
报告基因
的
列举
答:
(1)最常用的报告基因大多是编码抗生素抗性蛋白的基因
,通过检查产物是否具有抗生素的抗性来确定基因的表达情况。(2)氯霉素乙酰基转移酶(CAT):该报告基因来源于大肠杆菌转位子9,是第1个用于检测细胞内转录活性的报告基因。氯霉素乙酰基转移酶可催化乙酰CoA的乙酰基转移到氯霉素3羟基,而使氯霉素解毒。C...
入门级!6种
常见报告基因
介绍——GFP、hGH和SEAP
答:
常见的报告基因种类繁多,
例如氯霉素乙酰基转移酶基因(CAT)、人生长激素基因(hGH)、分泌型碱性磷酸酶基因(SEAP)等
。CAT适用于体外分析,hGH作为分泌型报告基因,可用ELISA试剂盒直接检测蛋白水平,适合高通量实验。SEAP则是通过酶活性检测,一步法和两步法生物发光法都有应用,灵敏度相对较低。以绿色荧光蛋...
什么是标记基因和
报告基因
答:
目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因(cat)、荧光素酶基因
(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、分泌型碱性磷酸酶基因(seap)、绿色荧光蛋白基因(gfp)等。
什么是
报告基因
检测法?
答:
转基因植物常用的报告基因主要有β-葡萄糖醛酸乙酰转移酶(β-glucuronidase)基因emphasis
:role=italicgusemphasis、胭脂碱合成酶(nopaline:synthase)基因emphasis:role=italicnosemphasis、章鱼碱合成酶(octopine:synthase)基因emphasis:role=italicocsemphasis、
荧光素酶
(luciferase)基因emphasis:role=...
标记
基因
的分类及其作用(抗性基因和标记基因的区别)
答:
12.理想的报告基因通常具备如下基本要求:①、受体细胞中不存在相应内源等位基因的活性。13.②、它的产物是唯一的,且不会损害受体细胞。14.③、具有快速、廉价、灵敏、定量和可重复性的检测特性。15.目前常用的报告基因有
氯霉素乙酰转移酶基因
(cat)、
荧光素酶
基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus...
什么是
报告基因
?
答:
目前
常用的
一种
报告基因
是β-D-葡萄糖苷酶基因,该酶催化底物形成β-D-葡萄糖苷酸,它在植物体中几乎无背景,组织化学检测很稳定,可用分光光谱、荧光等进行检测。荧光酶基因(luc)是1985年从北美荧火虫和叩头虫cDNA文库中克隆出来的,该酶在有ATP、Mg2+、O2和荧光素存在下发出荧光,这样就可用转基因...
什么是报道
基因
答:
地球生物包括动物、植物、微生物,数量巨大,种类繁多,形态各异,生存环境和生活习性各不相同,这都是由
基因
控制的。“种瓜得瓜、种豆得豆”是人们对这种现象的高度概括,即物种的生物学特征和特性是由基因决定的,是可以遗传的。一个基因编码一个蛋白质,蛋白质的功能决定生物体所表现出来的特征特性。
荧光素酶报告基因
检测
答:
常用
荧光素酶
报告基因载体:1、pRL-TK这个载体是由Promega开发的,pRL-TK是海肾荧光素酶报告载体,含有SV40增强子,质粒图谱如下所示:2、pGL3-Basic是萤火虫荧光报告载体,图谱如下图所示:从这两个图谱中可以发现,ppGL3-Basic这个载体主要是用于评估miRNA与靶基因3’UTR的结合,靶基因的3’UTR放在荧光...
标记
基因
的分类
答:
理想的报告基因通常具备如下基本要求:①、受体细胞中不存在相应内源等位基因的活性;②、它的产物是唯一的,且不会损害受体细胞;③、具有快速、廉价、灵敏、定量和可重复性的检测特性。
目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因
(cat)、
荧光素酶
基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)等。
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