入门级！6种常见报告基因介绍——GFP、hGH和SEAP

Question

如题所述

Answer 1

在科学研究中，报告基因是关键工具，它们的表达产物易于检测且与内源性背景区分明显。这些基因通过调控序列与目标基因结合，直接“报道”细胞内与基因表达相关的信号变化，特别适合于细胞内信号的监测。

报告基因的优点在于它们的低背景活性和高灵敏度，常与检测基因在载体质粒中整合，首先在大肠杆菌中扩增，再转入目标细胞。选择何种基因取决于实验环境和检测方法。报告基因的特点包括产物独特、不干扰其他检测、检测快速简便等。

常见的报告基因种类繁多，例如氯霉素乙酰基转移酶基因(CAT)、人生长激素基因(hGH)、分泌型碱性磷酸酶基因(SEAP)等。CAT适用于体外分析，hGH作为分泌型报告基因，可用ELISA试剂盒直接检测蛋白水平，适合高通量实验。SEAP则是通过酶活性检测，一步法和两步法生物发光法都有应用，灵敏度相对较低。

以绿色荧光蛋白(GFP)为例，其作为生物发光蛋白，被广泛用于细胞定位和分子相互作用研究。其优点在于非侵入性地观察细胞内事件，通过特定波长的光激发，GFP能直接发出绿色荧光。

选择报告基因时，需考虑其灵敏度、稳定性和监测范围，如hGH适合基因转录动力学研究，而GFP则常用于实时监控。了解这些基因及其检测方法，能帮助我们更精确地理解细胞内的生理过程。