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核酸杂交法筛选目的基因
如何从基因文库中
筛选目的基因
答:
有3种
方法
:
核酸杂交法
、PCR筛选法、免疫筛选法
核酸杂交
答:
广义的
核酸杂交
就是指非同源的核酸分子间的复性(氢键结合)过程。因此可以说,目前的
基因
检测技术,除了质普法外都或多或少的涉及了核酸杂交原理。如PCR的引物复性过程、基因芯片的杂交检测过程、基因测序的引物复性过程以及各种SNP检测
方法
等等。
利用基因工程技术进行药物的研制与开发时,
目的基因
的鉴定
方法
有哪些?其...
答:
利用标记的
核酸
做探针与转化细胞的DNA进行分子
杂交
,可以直接
筛选
和鉴定
目的
序列克隆。常用
的方法
是将转化后生长的菌落复印到硝酸纤维膜上,用碱裂菌,菌落释放的DNA就吸附在膜上,再与标记的核酸探针温育杂交,核酸探针就结合在含有目的序列的菌落DNA上而不被洗脱。核酸探针可以用放射性核素标记,结合了放射...
如何进行
目的基因
和目的的cDNA的
筛选
?
答:
筛选
一般用主要采用
杂交
技术(如Northen杂交、Southen杂交),采用的是单链
核酸
间互补配对的原理,或者使用鸟枪法导入,看性状能否表达。不知道据你要做什么 (一)从细胞核中直接分离 简单的原核生物
目的基因
可从细胞核中直接分离得到,但人类的基因分布在23对染色体上,较难从直接法中得到。直接分离基因...
功能蛋白组是怎样分离
目的基因
的?
答:
通过对蛋白质的序列分析,可以通过密码子的简并性设计简并引物,可利用RT-PCR得到
目的基因
的全长;应用
核酸杂交筛选法
分离目的基因,即利用简并寡核苷酸探针筛选cDNA或基因组文库;免疫学筛选法分离目的基因是通过蛋白的特异抗体与目的蛋白的专一结合,从表达文库中分离目的基因的蛋白基因。
如何进行
目的基因
片段分离,克隆和分析
答:
基因文库构建后,从文库中
筛选基因
的方法主要有以下几种:核算
杂交法
、免疫学检测法、DNA同胞选择法、PCR
筛选法
等。基因文库的构建是目前基因工程的核心工作,也是分离目的进的常用方法之一。3 功能蛋白组分离
目的基因
蛋白组是指细胞内全部蛋白的存在及活动方式,即基因组表达产生的总蛋白质的统称。功能...
怎样用DNA分子
杂交
技术证明
目的基因
转录出mRNA
答:
所采取的原理是分子
杂交
技术 ①mRNA与DNA可以杂交,因为两者组成的基本单位核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸可以进行碱基互补配对.由是否出现杂交带,可以判断出
目的基因
是否转录出mRNA、②取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作标记,以此来作为探针,将探针与mRNA杂交,来检测是否出现放射性 若未出现...
如何从
基因
文库中找到所需要的基因
答:
第一步,通过PCR
方法
将
目的基因
已知的部分核苷酸序列扩增出来,进行放射性同位素标记(也可以用别的标记方法进行,如生物素、荧光素等),即用标记了放射性同位素的目的DNA片段作为探针,与扩增出来的DNA
杂交
。第二步,将基因文库中的所有菌落转移至硝酸纤维膜上(也可以用其他类型的膜),然后,通过处理...
检测染色体DNA上插入了
目的基因的方法
答:
分子
杂交
技术。但是,可以用同位素标记的
核酸
探针与染色体dna杂交,将通过检测同位素的放射性,判断探针是否与染色体结合,结合则是插入
目的基因
。这也用到同位素标记了,但现在也有用荧光物质标记的探针,所以在两种技术选一的情况下,是分子杂交技术。真纠结啊,那就信书吧。其实检测
方法
很多,不只课本那一...
怎样用DNA分子
杂交
技术证明
目的基因
转录出mRNA?
答:
Northern blot 首先通过电泳
的方法
将不同的RNA分子依据其分子量大小加以区分,然后通过与特定
基因
互补配对的探针
杂交
来检测
目的
片段。“Northern blot”这一术语实际指的是RNA分子从胶上转移到膜上的过程,当然它现在通指整个实验的过程。Northern blot 在1977年由斯坦福大学James Alwine,David Kemp和George ...
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