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电泳液加多少tween
Westernblot中
Tween
-20的作用是什么?应该怎么用
答:
通常在TBST洗液中,
Tween-20的用量为0.5ml/L
,不加SDS。4. Western Blot是一种常用的实验方法,主要用于分子生物学、生物化学和免疫遗传学领域。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和深度,获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况信息。
Western blot 中
Tween
-20的作用是什么?应该怎么用
答:
Tween
-20是我们用TBST的时候Tween-20的用量是0.5ml/L,不加SDS。
sds
电泳
脱色需要多久
答:
20分钟到1小时不等。常见的SDS-PAGE脱色缓冲
液
包括甲醛缓冲液、乙酸缓冲液和
Tween
-20缓冲液等,不同的缓冲液所需时间也会略有不同。通常使用10%甲醛缓冲液进行脱色,脱色时间为20-30分钟左右。使用较弱的Tween-20缓冲液进行脱色,时间需要更长,甚至可以达到1小时左右。
Acr/Bic作用
答:
电泳液
缓冲液 Tris(MW121.14) 3.03g甘氨酸(MW75.07) 18.77gSDS 1g蒸馏水至 1000ml溶解后室温保存,次溶液可重复使用3~5次。(电泳液可以回收重复利用,一般将回收的电泳液加入垂直电泳槽的下半部分,上半部分最好使用新鲜的电泳缓冲液)(可以配制成10×电泳液缓冲液进行保存,稀释10倍使用)转移缓冲液 甘氨酸(MW75.07...
怎样鉴定细胞凋亡
答:
收集细胞→PBS洗涤→抽提细胞裂解
液
→蛋白定量→SDS-PAGE
电泳
→硝酸纤维素膜或PVDF膜转移→5%脱脂奶粉封闭,室温1.5~2h或4°C过夜→Caspase-3多抗或单抗室温反应1~2h或4°C过夜→TBS-T(含0.05%
Tween
20的TBS)洗3次,5~10min/次→HRP-标记的羊抗鼠IgG或AP标记的羊抗鼠IgG室温反应1~2h→ TBS-T洗3次, 5...
pcr的关键性技术
答:
PCR反应缓冲
溶液
通常用10 mmol/L Tris-HCl(PH8.3, 20C), 它是两性离子缓冲剂.此外,还有50 mmol/L KCL, 它有利于引物与模板退火.高于50mmol/L 的KCL, 或50mmol/L 的NaCl对Taq DNA聚合酶有抵制作用.明胶或血清白蛋白(100ug/ml)及非离子去污剂,如
Tween
20等,对Taq DNA聚合酶起稳定作用.4.6 PCR的热循环...
配置
电泳液
的时候需要
加tween
嘛
答:
用水的话会使得凝胶电阻很大,
电泳
过程中电流小、发热量大,DNA泳动效率低.所以配制琼脂糖凝胶一定要用缓冲液配制.里面的离子可以作为电导体.
...加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮和
tween
-80各有何作用
答:
8f2C-S4R3O9R4Te&{11、除用于
电泳
和紫外检测外,其余RNA-70℃冰箱保存备用。Q0o7V.]9x,{1i:__!U*X1m5G9A(W%U改良Krapp提取法:1r)r#s3~|.q1v.w试验试剂:'C7Z1^)J5A&f&W(Kd1、RNA抽提掖:母液:4mol异硫氰酸胍20mmolEDTA20mmolMESpH7.0。工作液:取400ml母液加入1.7ml2-ME贮存在4℃条件下...
用于基因分型的荧光探针PCR原理是什么
答:
有些反应
液
中以NH+4代K+,其浓度为16.6mmol/L。反应中加入小牛血清白蛋白(100μg/ml)或明胶(0.01%)或
Tween
20(0.05% ~0.1%)有助于酶的稳定,反应中加入5mmol/l 的二硫苏糖醇(DTT)也有类似作用,尤其在扩增长片段(此时延伸时间长)时,加入这些酶保护剂对PCR反应是有利的。 (四)Mg2+ Mg2+浓度直接影响...
常见食品中限量元素的含量范围及其测定意义?
答:
胡秋芬等建立以试剂2-2-喹啉偶氮)-5-二乙氨基酚(QADEAP)为柱前衍生试剂,内含2%醋酸甲醇
溶液
和pH4.0醋酸-醋酸钠缓冲溶液梯度洗脱为流动相,Waters Nova-Pak-C18液相色谱柱,二极管矩阵检测器,测定了食品中铁、钴、镍、铜、锌和锰,方法相对标准偏差在1.6%-3.5%之间,加标回收率在93%-107%之间。 3、毛细管
电泳
...
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