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简述重组体筛选的步骤
DNA克隆
重组体的筛选
答:
在生物技术中,DNA克隆重组体的筛选是一个关键步骤。
首先,通过转化、转染或者感染的技术,将重组DNA分子导入到受体细胞中
。这些细胞在特定条件下,如培养在涂布了适当培养基的培养板上,会形成大量的转化子菌落或者转染噬菌斑。每个重组体DNA分子都携带着特定的外源基因,而受体菌在接纳过程中通常只能接受一...
DNA
重组体的筛选
和鉴定的常用方法有哪几种?
答:
【答案】:DNA重组体的筛选和鉴定的常用方法是:
①抗药性标志选择:可在培养基中加入抗生素予以筛选,未转化的细菌被杀死,已转化的则生成菌落
。②核酸内切酶酶切图谱分析:利用核酸内切酶切割重组体,然后电泳检测进一步确定重组体是否含有目的基因。③分子杂交法:可把待选菌在平板上培养成菌落,用硝酸纤维...
DNA克隆的
重组体的筛选
答:
由于每一
重组体
只携带某一段外源基因,而 转化或转染时每一受体菌又只能接受一个重组体分子,如何将众多的转化菌落或转染噬菌斑区分开来,并鉴定哪一菌落或噬菌斑所含重组DNA分子确实带有目的基 因,这一
过程
即为
筛选
或选择。根据载体体系、宿主细胞特性及外源基因在受体细胞表达情况不同,可采取直接选择...
重组
子的重组子 - 重组子的
筛选
答:
根据质粒基因型和受体菌基因型互补原则而定; 重组子的筛选方法常用的有两种方法: 1、
抗生素筛选法:菌株为某种抗生缺陷型
, 而质粒上带有该抗性基因(如氨苄青霉素, 卡拉霉素等)这样只有转化子才能在含该抗生素的培养基上长出。本
重组
DNA(基因工程)的主要
步骤
。
答:
【答案】:重组DNA的主要步骤主要包括以下4个基本步骤:
(1)目的基因的获得;(2)目的基因与载体分子在体外进行连接反应,形成重组体
;(3)将人工重组的DNA分子导入能进行正常复制的寄主细胞,从而得到复制:(4)重组体分子的转化子克隆的选择和筛选。[考点]重组DNA的过程。重组DNA也叫基因工程,指指在体外...
植物基因工程的内容(基因克隆方法、连接、转化、
筛选
及鉴定)
答:
1)目的基因制备和分离:一般通过文库
筛选
、同源序列比对等方法进行克隆。2)DNA
重组
载体的构建:选择植物表达载体,根据载体选择或添加酶切位点,然后进行酶切连接,构建重组载体。3)转化:转化方法有多种:农杆菌法:将重组载体用电击或热激的方法将其转入农杆菌中,再用农杆菌侵染植物;基因枪法:将...
典型的DNA
重组
实验通常包括哪些
步骤
答:
重组
DNA技术主要包括四个
步骤
:提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。1、提取目的基因:获取目的基因主要有两条途径:一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因;另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。2、目的基因...
求原核表达详细
步骤
答:
基本
步骤
:目的基因的扩增、载体与目的基因双酶切、电泳、割胶回收、目的基因与载体的连接反应、
重组体筛选
、验证重组体、转化入大肠杆菌进行表达。问题在于:目的基因如何获取,扩增策略的决定,表达载体的选择,双酶切选择哪一对限制性内切酶,如何筛选重组体等等。
如何
筛选
双亲优良性状的高产酵母融合子
答:
其
筛选步骤
如下:1、首先选择亲本,选择两个具有育种价值并带有选择性遗传标记的融合子作为亲本。2、其次制备原生质体,经溶菌酶除去细胞壁,释放出原生质体,并置高渗液中维持其稳定。3、最后融合子筛选,产生的融合子中有杂合双倍体和单倍
重组体
不同的类型,前者性能不稳定,要选出性能稳定的单倍重组体...
噬菌
体重组
率不是百分百,怎么
筛选
更快
答:
噬菌
体重组
率不是百分百,
筛选
更快的方法:1、选择高效的转染方法,可以提高噬菌体DNA导入细胞的效率。2优化培养条件,提高细胞生长和重组效率。3、选择正确的选择标记帮助筛选成功
重组的
噬菌体。
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