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DNA重组体的筛选和鉴定的常用方法有哪几种?
如题所述
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推荐答案 2023-04-17
【答案】:DNA重组体的筛选和鉴定的常用方法是:①抗药性标志选择:可在培养基中加入抗生素予以筛选,未转化的细菌被杀死,已转化的则生成菌落。②核酸内切酶酶切图谱分析:利用核酸内切酶切割重组体,然后电泳检测进一步确定重组体是否含有目的基因。③分子杂交法:可把待选菌在平板上培养成菌落,用硝酸纤维素膜盖在平板上,菌落DNA就会转移到滤膜上,然后用放射性同位素(
32
P)标记的目的基因片段作为探针进行检测,就可把正确的重组菌落探测出来。
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筛选和鉴定DNA重组体
答:
通过目的基因的特性来筛选
、比如用青霉素或者其他抗性环境来择选载入成功的重组体、活下来的就是目的基因表达成功的、
DNA
克隆的
重组体的筛选
答:
根据载体体系、宿主细胞特性及外源基因在受体细胞表达情况不同,
可采取直接选择法或非直接选择法
。
dna重组
子
的筛选鉴定有
哪些步骤
答:
一、质粒DNA 提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒。
二、制备重组DNA 在灭菌的1.5mL 离心管中,加入pQE-31质粒10mL(2mg/mL),2mL酶切缓冲液
,1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液(各含10个单位),无菌双蒸水7mL,至反应混合物总体积为20mL,离心混匀,37℃反应过夜。2. 在另一无菌1.5mL 离心管中...
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