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菌液送测序一直失败无信号
菌液测序无信号
答:
造成这个问题的主要原因有:1、质粒提的不好,导致测序没有信号;2、使用的引物不匹配
。如果是用载体引物测的,那么需核实载体与引物的匹配性,不过不排除载体上引物结合位点被破坏的可能性;如果是用扩增引物测的,那么就要排除空载体的情况。既然你肯定了不是空载体,那么就不存在这个问题。3、测序反应...
求助
菌液
PCR跑了好几次都是阳性,
测序
却
没有信号
答:
可能你的菌液不是单克隆,还有可能你的目的片段有重复序列,形成发夹结构
。 本回答被提问者采纳 1 已赞过 已踩过< 你对这个回答的评价是? 评论 分享 新浪微博 QQ空间 举报 收起 1条折叠回答 其他类似问题2013-03-28 为什么菌液PCR 引物一个载体上的 一个是PCR片段上的 鉴... 2016-07-24 菌液PCR的...
粘细菌16SrDNA
测序
出现
无信号
,信号低的原因是什么?16SrDNA的序列通常...
答:
可能是浓度低
cDNA
测序
,回收的cDNA跑胶都有条带,送
菌液
去公司测序说是
信号
弱测不出 ...
答:
浓度不够或者条带不单一
,测序不是说能看到条带就能测的,如果没有明显的主测序峰也算信号弱。
为什么会出现
测序无
反应
信号
,最好能把可能的原因列举一下,谢谢_百度知 ...
答:
1.pcr产物模板量太少
2.引物不合适 3.菌样活性太低,提取质粒量太少
...一个是PCR片段上的 鉴定正确后
测序
却完全不同?
信号
中断?_百度...
答:
是定向克隆粘末端连接?如果不是有连接反了的可能 再有一种可能就是送去
测序
的菌液有问题 我有次是同样的片段测序,
菌液没
出来,用测序引物PCR的产物测序就合适了,可能菌液污染了
DNA
测序不成功
答:
首先跟公司确认抗生素是否正确,没问题的话就是你的
菌液
的问题了。菌液新鲜吗?时间长了或者没加甘油的话菌的活性会降低。另外,检查你的抗生素是否失效,抗生素失效的话,你摇出来的菌都是
没有
抗性的,所以到
测序
公司那里才会摇
菌失败
。另外,建议以后测序最好自己摇菌,抽提质粒,然后电泳检测,电泳...
菌液
PCR的时候能P出目的条带,为什么
测序
却完全不正确?
答:
因 不同的酶反应条件不一样,
细菌已经通过摇床摇起,
送测序
为什么说提取质粒
失败
,要从新摇
菌
呢
答:
因为你用的是表达用的菌株,这里的质粒的拷贝数都不高,所以你可以把质粒自己提取出来,洗脱的时候少加点洗脱
液
,拿质粒去
测序
。还可以把这个质粒转到DH5a中,送去测序。
DNA
测序
为什么会
失败
答:
当客户把成批的样品交给商业化的测序公司时,经常会被告知一些样本
没有
结果,或是测得不好,无法提供图谱。做为客户常常不清楚
测序失败
的原因,对于一些重要的样品只好改送另外的测序公司试试看。DNA 测序失败的原因归纳起来有三种: 一是模板的原因,模板的质量很重要,加入反应里的模板“量”并不很严...
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