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wb电泳液和转膜液配方
wb
实验全称叫什么?
答:
wb
的实验步骤 制样:裂解缓冲液或者超声处理。(使用RIPA裂解液是需按照100:1加入蛋白酶抑制剂)。
电泳
:根据蛋白大小确定合适的PAGE胶浓度,推荐上样量为20-30ug总蛋白。
转膜
:湿转和半干转都可。但在待检测蛋白分子量较大或低内源水平湿转移方法更佳。洗膜:10min/次*3次。封闭:含5%脱脂奶粉的TBST中...
wb
实验是什么实验啊?
答:
wb
的实验步骤 制样:裂解缓冲液或者超声处理。(使用RIPA裂解液是需按照100:1加入蛋白酶抑制剂)。
电泳
:根据蛋白大小确定合适的PAGE胶浓度,推荐上样量为20-30ug总蛋白。
转膜
:湿转和半干转都可。但在待检测蛋白分子量较大或低内源水平湿转移方法更佳。洗膜:10min/次*3次。封闭:含5%脱脂奶粉的TBST中...
WB
实验是什么意思?
答:
wb
的实验步骤 制样:裂解缓冲液或者超声处理。(使用RIPA裂解液是需按照100:1加入蛋白酶抑制剂)。
电泳
:根据蛋白大小确定合适的PAGE胶浓度,推荐上样量为20-30ug总蛋白。
转膜
:湿转和半干转都可。但在待检测蛋白分子量较大或低内源水平湿转移方法更佳。洗膜:10min/次*3次。封闭:含5%脱脂奶粉的TBST中...
wb
实验是什么实验?要怎么做呢?
答:
wb
的实验步骤 制样:裂解缓冲液或者超声处理。(使用RIPA裂解液是需按照100:1加入蛋白酶抑制剂)。
电泳
:根据蛋白大小确定合适的PAGE胶浓度,推荐上样量为20-30ug总蛋白。
转膜
:湿转和半干转都可。但在待检测蛋白分子量较大或低内源水平湿转移方法更佳。洗膜:10min/次*3次。封闭:含5%脱脂奶粉的TBST中...
WB
实验具体是什么实验啊?
答:
wb
的实验步骤 制样:裂解缓冲液或者超声处理。(使用RIPA裂解液是需按照100:1加入蛋白酶抑制剂)。
电泳
:根据蛋白大小确定合适的PAGE胶浓度,推荐上样量为20-30ug总蛋白。
转膜
:湿转和半干转都可。但在待检测蛋白分子量较大或低内源水平湿转移方法更佳。洗膜:10min/次*3次。封闭:含5%脱脂奶粉的TBST中...
伯乐快速半干转缓冲
液配方
答:
转膜
缓冲液的
配制方法
:39mMglycine2.9g,48mMtris5.8g,SDS0.37g加入600ml去离子水,充分搅拌溶解。加去离子水将
溶液
定容至800ml后,加入200ml甲醇。室温保存。5*SDS-PAGE
电泳
缓冲液0.125Mtris15.1g,1.25Mglycine94g,0.5%SDS5.0g,加入800ml去离子水,搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至1L后...
蛋白质page
电泳
时,电泳缓冲液可以重复使用吗
答:
我们实验室用的是:5*SDS-PAGE
电泳
缓冲液0.125Mtris15.1g,1.25Mglycine94g,0.5%SDS5.0g,加入800ml去离子水,搅拌溶解。加去离子水将
溶液
定容至1L后,室温保存。用的时候稀释成1*的就可以了。
转膜
缓冲液的
配制方法
:39mMglycine2.9g,。
western blot的具体步骤?
答:
该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。二、试剂准备 1、SDS-PAGE试剂:见
电泳
实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。3、
转膜
缓冲
液
:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至1000ml。4、0.01M...
SDS-PAGE的操作步骤
答:
5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲
液
可以参考相关文献资料
配制
,也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)(P0015)。100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白[V2] 。(3) 上样与
电泳
冷却到室温后,把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。为了便于观察电泳效果
和转膜
效果,以及判断蛋白分子...
wb
实验的原理和步骤
答:
WB
实验是通过聚丙烯酰胺凝胶
电泳
(PAGE)将混合蛋白质样品分离后,利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质(例如PVDF膜)上,再以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原。 与相对应的第一抗体特异性结合,之后再与酶或同位素标记的第二抗体相结合,最终通过底物显色或放射自显影来检测特异性目的基因表达的蛋白成分。 蛋白质样品制备...
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