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原位杂交探针合成
荧光
原位杂交
会用到哪些试剂?
答:
1. 实验材料:- 人外周血中期染色体细胞标本 - 人MyoD1(MYF3)基因
探针
2. 试剂:- 指甲油 - 甲酰胺 - 氯化钠 - 柠檬酸钠 - 氢氧化钠 - 吐温20 - 20×SSC溶液 - 去离子甲酰胺(DF)- 70%甲酰胺/2×SSC溶液 - 50%甲酰胺/2×SSC溶液 - 50%硫酸葡聚糖(DS)-
杂交
液 - PI/anti...
哪位大虾知道荧光
原位杂交
技术的原理
答:
荧光
原位杂交
技术(Florescence In-Situ Hybridization简称FISH)是一种利用非放射性的荧光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合起来,通过荧光标记的DNA
探针
与待测样本的DNA进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而...
原位杂交
的正义
探针
和反义探针是如何界定的?
答:
如果使用的质粒在克隆的模板序列上均带有启动子,由此产生的反义链
探针
可与mRNA
杂交
,而正义链探针不产生杂交信号,即: 反义RNA链---又称cRNA链, 用作杂交的探针。 正义RNA链---用于杂交的阴性对照
原位杂交
和核酸杂交是一种吗
答:
经放射自显影或显色反应检测特异结合的
探针
.经典的核算杂交方法主要包括:DNA印迹杂交(Southern blot)RNA印迹杂交(Northern blot)以及斑点杂交和
原位杂交
:1、 DNA印迹杂交(DNA blot hybridization)——有两种核酸印迹法:将DNA或RNA溶液直接点样于硝酸纤维素膜或尼龙膜上(斑点或狭线印迹)经琼脂糖凝胶...
简明扼要讲一下Southern blotting,PCR,
原位杂交
答:
原位杂交
:在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DAN或 RNA片段作为核酸
探针
,与...
荧光
原位杂交
技术应用
答:
荧光
原位杂交
(FISH)技术是一种强大的研究工具,应用于基因定位、未克隆基因研究以及染色体畸变分析。它在基因定性和定量分析,基因整合、表达调控等领域展现独特优势。在临床细胞遗传学中,FISH广泛使用α、β和经典卫星DNA
探针
,如α卫星DNA用于检测着丝粒,β卫星DNA检查染色体异染色质区域,经典卫星DNA则用于...
为什么荧光
原位杂交
实验中细胞核非特异性吸附
答:
探针
的荧光素标记可以采用直接和间接标记的方法。间接标记是采用生物素标记的dUTP(biotin-dUTP) 经过缺口平移法进行标记;而直接标记法是将荧光素直接与探针核苷酸的磷酸戊糖骨架共价结合,或在缺口平移法标记探针时将荧光素核苷三磷酸掺入。
原位杂交
术可在原位检测细胞
合成
某种多肽或蛋白质的基因表达,有很高...
荧光
原位杂交
技术的特点
答:
原位杂交
的
探针
按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用同位素标记的放射性探针优势在于对制备样品的要求不高,可以通过延长曝光时间加强信号强度,故较灵敏。缺点是探针不稳定、自显影时间长、放射线的散射使得空间分辨率不高、及同位素操作较繁琐等。采用荧光标记系统则可克服这些不足,这就是FISH...
原位杂交
技术和免疫细胞化学技术的联系与区别
答:
原位杂交
技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有放射性或非放射性的外源核酸(即
探针
)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结
合成
专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。免疫细胞化学是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内...
光镜水平上的
原位杂交
与电镜水平上的原位杂交的区别
答:
用标记的核酸
探针
通过分子杂交确定特异核苷酸序列在染色体上或在细胞中的位置的方法称为
原位杂交
。区别是探针标记物不同,电镜原位杂交技术以生物素等一些生物小分子代替光镜中的放射性同位素或荧光素标记的探针。同时检测方法不同,电镜下杂交反应的检测是通过与抗生物素抗体相连的胶体金颗粒显示出来,光镜下...
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