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标记基因怎么筛选重组DNA
怎么筛选
含
重组dna
的细胞?没分了。急需帮助!
答:
在做
基因重组
的时候,目的基因插入到质粒。做基因工程所用的质粒一般带都有抗药基因。在插入目的基因,并转染大肠杆菌后,被转染的大肠杆菌就有了目的基因和抗药基因。所以被转染的能存活,而没有转染的不能生长。这里抗药基因是作为
筛选基因
,和目的基因并列,不破坏目的基因。
如何
用放射性
标记
核酸探针从
基因
文库中
筛选
目的
重组
菌
答:
通常要采取建立细菌
基因
组
DNA
文库的办法,即将细菌DNA切成小片段后分别克隆得到包含基因组的全信息的克隆库.然后用多种其它菌种的DNA作探针来
筛选
,产生杂交信号的克隆被剔除,最后剩下的不与任何其它细菌杂交的克隆则可能含有该细菌特异性DNA片段.将此
重组
质粒
标记
后作探针进一步鉴定,亦可经DNA序列分析鉴定其...
怎么
通过
标记基因
挑选含有目的基因的质粒质粒中本来
答:
如果是做
基因
克隆的话,可以直接用蓝(兰)白斑
筛选
。一般的克隆载体上有lac z基因,在iptg和x-gal作用下能产生蓝斑,而此基因中间有多克隆位点,当你的片段基因插入时,把这个基因给破坏了,不能产生兰斑,而只是产生白斑。这样就区别开来,象puc18/19,pbr322等最常用的质粒都有lac z基因。
有关
标记基因
和受体细胞的
筛选
的问题
答:
首先,不是任何大肠杆菌都可以作为受体菌的,感受态细胞就是受体细胞需要选择对抗性标记敏感的菌株,就是说如果准备转化入受体菌的
重组
质粒用四环素做标记,受体菌本身对四环素是敏感的才行,否则就得更换菌株或者更换
筛选标记
。其次,
标记基因
和目的基因(用你举例的四环素)是体外利用基因工程技术重组到一起...
质粒中
怎么
对
标记基因
进行
筛选
答:
如果你的意思
是如何
对插入片段/
基因筛选
的话,可以考虑使用有LacZ/蓝白斑筛选性质的载体。如果没有合适的载体可以用菌落PCR的方法,设计PCR引物在载体插入位点2边各约100bp以内(常用引物的多克隆位点两侧一般有通用引物区域),在转化之后的培养基上挑取单克隆少量菌体为模版进行PCR,如果包含长入片段则PCR...
利用质粒上的
标记基因
可用来
筛选
含有
重组DNA
的细胞和转基因植物 为何错...
答:
筛选细胞的话是对的。但是转基因植物是不用
标记基因筛选
的,目的基因导入植物后,用分子杂交检验目的基因是否插入和表达,再将表达了的细胞(或组织)进行组织培养获得新植株。所以转基因植物是不用标记基因筛选的。不明白可追问
标记基因
答:
然后我们将这些质粒导入到受体细胞中去。比如说
标记基因
是抗青霉素基因,那么我们接下来将受体细胞在含有青霉素的培养基上进行培养。由于大肠杆菌本来不存在对青霉素的抗性,因此存活下来的必定是导入质粒的大肠杆菌。这样就
筛选
掉了未导入质粒的细胞。有利于筛选含有
重组DNA
的细胞。抗性基因之所以和目的基因有...
如何
从
基因
文库中找到所需要的基因?
答:
为了
筛选
真核生物的某种
基因
,常从它的转录产物mRNA经反向转录(见中心法则)合成相应的互补
DNA
(cDNA),再加入用32P
标记
的核苷三磷酸,用DNA多聚酶I切口移位方法制成有同位素标记的探针。把探针 DNA和硝酸纤维滤膜上的菌落或噬菌体分别进行变性处理,然后进行分子杂交。再将 X光底片覆盖在经过处理的滤膜...
质粒
dna
免疫小鼠载体抗性
基因
有哪些
答:
从而更方便地筛选出含有
重组DNA分子
的克隆。四环素抗性基因:四环素抗性基因也可以赋予宿主细胞对四环素的抗性,从而在
筛选重组
子时,通过添加四环素来淘汰非重组子,更方便地筛选出含有重组DNA分子的克隆。此外,四环素抗性基因也可以被用于
标记基因
,帮助鉴定和筛选含有重组DNA分子的细胞或个体。
高中生物中,标记基因和目的基因是连在一起的吗?
如何
用
标记基因筛选
目的...
答:
而且运载体上必须要有标记基因,目的基因,启动子,终止子和复制原点的 如果载有目的基因的运载体没有成功的进入宿主细胞的话 你在最后检测的时候 你的宿主细胞就不会被检测到有目的基因嵌入到该细胞的
DNA
上的迹象 这也正是标记基因的作用。用
标记基因筛选
目的基因载体 是你选择什么样的标记基因 就好像...
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