标记基因

Question

就大肠杆菌来说，标记基因或抗性基因是某些大肠杆菌才有的。
也就是说，抗性基因（标记基因就不写了）本身就是在大肠杆菌质粒上的。
那么就算没有导入目的基因，有这种质粒的大肠杆菌不也能存活吗？就算导入了目的基因，如果没有这种质粒不是一样会死么？
大肠杆菌本身就有的质粒基因和导入的目的基因有什么必然联系吗？为什么本来质粒上就有的的基因可以筛选目的基因，还可以检验目的基因是否成功导入？
有抗性基因的可以活没有的就活不了，它活不活和有没有成功导入目的基因有关系吗？我怎么觉得没关系呢！可是那个地方都说有关系，我的高中课本很明确的写出来“抗性基因是一种标记基因，有利于筛选含重组DNA的细胞”呢！！
这到底是为什么啊！！！

Answer 1

首先，标记基因一般来说是对某种抗生素的抗性，就是所说的抗性基因。而自然界中，具有这种抗性基因的大肠杆菌存在，但是是很少的。因为如果大部分大肠杆菌都携带这种基因的话，抗生素就无效了。因此，我们做实验用的大肠杆菌可以认为是没有抗性基因的，它没有含有抗性基因的质粒。何况我们还可以对实验菌种先进行筛选。
第二，基因工程的过程是这样的。我们将目的基因与含有标记基因的质粒用同一种限制性核酸内切酶进行切割，然后将它们混合，使之成为重组质粒，即同时含有标记基因与目的基因的质粒。当然这步也会出现原来的质粒自己和自己的两端重新结合的状况。然后我们将这些质粒导入到受体细胞中去。比如说标记基因是抗青霉素基因，那么我们接下来将受体细胞在含有青霉素的培养基上进行培养。由于大肠杆菌本来不存在对青霉素的抗性，因此存活下来的必定是导入质粒的大肠杆菌。这样就筛选掉了未导入质粒的细胞。有利于筛选含有重组DNA的细胞。
抗性基因之所以和目的基因有关系是因为目的基因和抗性基因是同时存在于重组DNA上的。