【生物-选修3：现代生物科技专题】如图为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上存活）和小鼠骨

Question

【生物-选修3：现代生物科技专题】如图为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上存活）和小鼠骨髓瘤细胞（具分裂能力、不能在HAT培养基上存活）进行人类基因定位的操作示意图，请回答． 1 杂交细胞 A B C 人染色体 l - + + 2 + - + 3 + + - 酶 m + - + n - + + p + - + q - + +（1）图示技术名称为______，该技术的基础是______技术．（2）操作所用的成纤维细胞应在______代以内；诱导融合运用了______原理，该过程中区别于原生质体融合的方法是用______处理．（3）HAT培养基属于______培养基，其中需要加入______等天然物质．（4）培养时PH一般为______；为操作中加人鸟本苷的目的是______．（5）如表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶（“+”表示存在，“-”表示不存在），这4种酶均为单基因编码产生，据表判断，编码______酶的基因位于染色体2上．

Answer 1

（1）由图分析，该过程为动物细胞融合，其基础是动物细胞培养．
（2）目前使用的正常细胞通常为10代以内的，可以保持细胞正常的二倍体核型．诱导两个动物细胞融合，原理是细胞膜的流动性；可以采用物理（离心、振动）、化学（PEG）、生物诱导（灭活的病毒）融合方法，其中区别于植物原生质体融合的是生物诱导融合中采用的灭活病毒．
（3）成纤维细胞能在HAT培养基上存活，小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上存活，说明HAT培养基属于选择培养基，其中需要加入血浆等天然物质．
（4）培养动物细胞时一般pH设置为7.2-7.4；诱导细胞融合后，培养基中会出现3中融合细胞，成纤维细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合和杂交瘤细胞，为了除去成纤维细胞，则需要在培养基中加入鸟本苷．
（5）据表判断，杂交细胞A中存在2和3号染色体，表达出酶m和p；杂交细胞B存在1和2号染色体，表达出酶n和q；说明编码m和p酶的基因位于染色体2上．
故答案为：
（1）动物细胞融合    动物细胞培养
（2）10     细胞膜的流动性    灭活病毒
（3）选择   血浆（血清）
（4）7.2-7.4    除去成纤维细胞
（5）m和p