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是关于老鼠瘦素的说明书!!内容是关于化验程序.
Assay Procedure
Bring all reagents to room temperature for at least 30 minutes prior to opening.
All standards and samples should be run in duplicate.
1.Refer to the Assay Layout Sheet to determine the number of wells to be used and put any
remaining strips with the desiccant back into the foil pouch and seal the ziploc. Store unused wells at 4!C.
2.Pipet 100 |L of Assay Buffer into the S0 (0 pg/mL Standard) wells.
3.Pipet 100 |L of Standards #1 through #7 into the appropriate wells.
4.Pipet 100 |L of the Samples into the appropriate wells.
5.Tap the plate gently to mix the contents.
6.Seal the plate and incubate for 1 hour at 37!C.
7.Empty the contents of the wells and wash by adding 400 |L of wash solution to every well.
Repeat the wash 6 more times for a total of 7 washes. After the final wash, empty or aspirate
the wells, and firmly tap the plate on a lint-free paper towel to remove any remaining wash buffer.
8.Pipet 100 |L of the prepared Labeled Antibody into each well, except the Blank.
9.Seal the plate and incubate at 37!C for 30 minutes.
10.Empty the contents of the wells and wash by adding 400 |L of wash solution to every well.
Repeat the wash 8 more times for a total of 9 washes. After the final wash, empty or aspirate the wells, and firmly tap the plate on a lint-free paper towel to remove any remaining wash
buffer.
11.Add 100 |L of the TMB Substrate to each well.
12.Incubate for 30 minutes at room temperature in the dark.
13.Add 100 |L of Stop Solution to each well.
14.Blank the plate reader against the Blank wells, read the optical density at 450 nm, preferably
with correction between 570 and 590 nm. If the plate reader is not able to be blanked against the Blank wells, manually subtract the mean optical density of the Blank wells from all
readings.

检测程序
把所有试剂室温至少30分钟前开幕。
所有标准和样品应在运行复制。
1.refer来检测板布局,以确定有多少口井被用来把任何
其余带与干燥剂重返铝箔袋密封医药。商店未井4 ! c.
2.pipet 100 | l的检测缓冲区进入s0 ( 0加值/毫升标准)水井。
3.pipet 100 | l的标准# 1 # 7成适当的水井。
4.pipet 100 | l号样品到适当的水井。
5.tap板轻轻混合内容。
6.seal板孵育1小时37 ! c.
7.empty内容水井和洗净加入400 | l的清洗液,以每井。
重复洗6次,一共有7刷。经过最后洗,空或抽吸
水井,牢牢把握板对皮棉无手纸,以消除任何剩余洗涤缓冲。
8.pipet 100 | l的准备标记抗体到每一口井,除了空白。
9.seal板孵育37 !三,为30分钟。
10.empty内容水井和洗净加入400 | l的清洗液,以每井。
重复洗8次为一共有9刷。经过最后洗,空或抽吸井,牢牢把握板对皮棉无手纸,以消除任何剩余的洗
缓冲区。
11.add 100 | 1条青马大桥衬底,以每一口井。
12.incubate 30分钟,在室温和黑暗。
13.add 100 | l号停止解决每一口井。
14.blank板读者对空白井,阅读光密度在450毫微米,最好
矫正至570和590 nm左右。如果板是读者不能将去掉针对空白井,手动减去平均光密度空白井从所有
读。
分析用试样做法
带来所有试剂给室温至少30 分钟在开头之前。
所有标准和样品应该跑一式两份。
1.Refer 对分析用试样布局板料确定井的数量被使用和投入任何
残余的小条与干燥剂回到箔囊和密封ziploc。存放未使用的井在4!C 。
2.Pipet 100 分析用试样缓冲|L 入S0 (0 个pg/mL 标准) 涌出。
3.Pipet 100 标准#1 |L 通过#7 入适当的井。
4.Pipet 100 样品的|L 入适当的井。
5.Tap 板材柔和混合内容。
6.Seal 板材和孵化在1 个小时在37!C 。
7.Empty 井和洗涤的内容由增加400 洗涤解答|L 来每口井。
重覆洗涤6 另外倍为一共计7 次洗涤。在最后的洗涤, 倒空或吐气之后
井, 和牢固地轻拍板材在一卷lint-free 毛巾纸去除任何剩余洗涤缓冲。
8.Pipet 100 准备的被标记的抗体的|L 入每个很好, 除了空白。
9.Seal 板材和孵化在37!C 30 分钟。
10.Empty 井和洗涤的内容由增加400 洗涤解答|L 来每口井。
重覆洗涤8 另外倍为一共计9 次洗涤。在最后的洗涤, 倒空或吐气之后井, 和牢固地轻拍板材在一卷lint-free 毛巾纸取消任何次剩余洗涤
缓冲。
11.Add 100 TMB 基体的|L 对每个很好。
12.Incubate 30 分钟在室温在黑暗。
13.Add 100 中止|L 对每个的解决办法很好。
14.Blank 板材读者反对空白井, 读了光学密度在450毫微米, 更好地
以更正在570 和590 毫微米之间。如果板材读者不能被删去反对空白的井, 手工减去空白的井的卑鄙光学密度从所有
读书。

参考资料:http://fanyi.cn.yahoo.com/translate_txt

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