求救 三聚氰胺

Question

我是一名学生我想用薄层的方法从奶粉中检出三聚氰胺，但现在找不到合适的薄层检识的显色剂。望那位大侠能帮帮小弟解决这个难题。
最好详细叙述检测方法。

Answer 1

主要是：对奶粉等样品的预处理可采用Sepax-UCT DBX产品（60 mg / 3 mL，产品订货号SSDBX063）。

一、SPE样品预处理
对奶粉等样品的预处理可采用Sepax-UCT DBX产品（60 mg / 3 mL，产品订货号SSDBX063）。
样品的处理步骤如下：
取奶粉5 g，加入1%三氯乙酸水溶液50 mL，摇匀。再加2 %乙酸铅2 mL，超声波处理20分钟，离心分离（8000转/分）10 min，取上清液作为待测样品。
SPE步骤如下：
（1）SPE柱的活化：取Sepax-UCT DBX产品（60 mg / 3 mL，产品订货号 SSDBX063），依次用甲醇3 mL和水3 mL冲洗。
（2）上样：取上述样品溶液3 mL加入SPE柱的顶端。液滴的流速控制在1 mL/min以内。
（3）洗涤：用水3 mL和甲醇3 mL进行冲洗，抽近干。
（4）洗脱：用5 mL含5 %氨水的甲醇进行冲洗，收集洗脱液，在50℃下用氮气吹干，然后加入2 mL流动相溶解。

二、HPLC检测
在常规的三聚氰胺HPLC检测方法中，为了提高三聚氰胺在反相柱上的保留时间，常常需要在流动相中添加离子对试剂。这种方法的主要弊端是离子对试剂挥发性差，而且会抑制样品的离子化效率，因此不易实现LC与MS的联用来降低分析方法的检测限。
针对上述技术缺陷，赛分科技基于HILIC和阳离子交换分离机理，开发了新的三聚氰胺HPLC分析方法。在新的HPLC体系中，三聚氰胺在色谱柱上具有适中的保留。而且，由于流动相为含易挥发性盐的乙腈水体系，因此可以实现LC与MS的联用，从而有助于降低分析方法的检测限。
(1) HILIC方法
该方法采用赛分公司的HILIC Polar-100色谱柱（4.6 mm I.D.×250 mm，5 μm，订货号131585-4625）。
色谱条件
色谱柱：HILIC Polar-100（4.6 mm I.D.×250 mm, 5 μm）
流动相：10 mM NH4Ac: 乙腈=10: 90 (v/v)
流速：1 mL/min
进样量：10 μL
检测波长：240 nm
参考谱图如下。

（2）离子交换色谱法
该方法采用采用赛分公司的Sepax HP-SCX色谱柱（4.6 mm I.D.×250 mm，5 μm，订货号120365-4625）。
色谱条件
色谱柱：Sepax HP-SCX（4.6 mm I.D.×250 mm，5 μm）
流动相：10 mM NH4Ac
流速：1 mL/min
进样量：10 μL
检测波长：240 nm
参考谱图如下。在该色谱体系中，以三聚氰胺计理论塔板数每米可高达180000，如此高的柱效使其非常利于食品中三聚氰胺的测定。

（3）常规方法
针对常规的离子对色谱方法，赛分公司的Sepax GP-C8色谱柱（4.6 mm I.D.×150 mm，5 μm，订货号107084-4615）也非常适合。
a. 色谱条件I：参考中国农业部标准NY-T 1372-2007
色谱柱：Sepax GP-C8（4.6 mm I.D.×150 mm，5 μm）
缓冲液：10 mM柠檬酸，10 mM庚烷磺酸钠
流动相：缓冲液: 乙腈=90: 10 (v/v)
流速：1 mL/min
进样量：10 μL
检测波长：240 nm
参考谱图如下。其中三聚氰胺在8.8 min出峰，拖尾因子1.0，以三聚氰胺计理论塔板数每米可高达80000。

b. 色谱条件II：参考美国食品药品监督管理局（FDA）三聚氰胺检测方法
色谱柱：Sepax GP-C8（4.6 mm I.D.×150 mm，5 μm）
缓冲液：10 mM柠檬酸，10 mM辛烷磺酸钠，调pH为3.0
流动相：缓冲液: 乙腈=85: 15 (v/v)
流速：1 mL/min
进样量：10 μL
检测波长：240 nm
参考谱图如下。其中三聚氰胺在8.2 min出峰，拖尾因子1.0，以三聚氰胺计理论塔板数每米可高达80000。

Answer 2

主要是：对奶粉等样品的预处理可采用Sepax-UCT DBX产品（60 mg / 3 mL，产品订货号SSDBX063）。

一、SPE样品预处理
对奶粉等样品的预处理可采用Sepax-UCT DBX产品（60 mg / 3 mL，产品订货号SSDBX063）。
样品的处理步骤如下：
取奶粉5 g，加入1%三氯乙酸水溶液50 mL，摇匀。再加2 %乙酸铅2 mL，超声波处理20分钟，离心分离（8000转/分）10 min，取上清液作为待测样品。
SPE步骤如下：
（1）SPE柱的活化：取Sepax-UCT DBX产品（60 mg / 3 mL，产品订货号 SSDBX063），依次用甲醇3 mL和水3 mL冲洗。
（2）上样：取上述样品溶液3 mL加入SPE柱的顶端。液滴的流速控制在1 mL/min以内。
（3）洗涤：用水3 mL和甲醇3 mL进行冲洗，抽近干。
（4）洗脱：用5 mL含5 %氨水的甲醇进行冲洗，收集洗脱液，在50℃下用氮气吹干，然后加入2 mL流动相溶解。

二、HPLC检测
在常规的三聚氰胺HPLC检测方法中，为了提高三聚氰胺在反相柱上的保留时间，常常需要在流动相中添加离子对试剂。这种方法的主要弊端是离子对试剂挥发性差，而且会抑制样品的离子化效率，因此不易实现LC与MS的联用来降低分析方法的检测限。
针对上述技术缺陷，赛分科技基于HILIC和阳离子交换分离机理，开发了新的三聚氰胺HPLC分析方法。在新的HPLC体系中，三聚氰胺在色谱柱上具有适中的保留。而且，由于流动相为含易挥发性盐的乙腈水体系，因此可以实现LC与MS的联用，从而有助于降低分析方法的检测限。
(1) HILIC方法
该方法采用赛分公司的HILIC Polar-100色谱柱（4.6 mm I.D.×250 mm，5 μm，订货号131585-4625）。
色谱条件
色谱柱：HILIC Polar-100（4.6 mm I.D.×250 mm, 5 μm）
流动相：10 mM NH4Ac: 乙腈=10: 90 (v/v)
流速：1 mL/min
进样量：10 μL
检测波长：240 nm
参考谱图如下。

（2）离子交换色谱法
该方法采用采用赛分公司的Sepax HP-SCX色谱柱（4.6 mm I.D.×250 mm，5 μm，订货号120365-4625）。
色谱条件
色谱柱：Sepax HP-SCX（4.6 mm I.D.×250 mm，5 μm）
流动相：10 mM NH4Ac
流速：1 mL/min
进样量：10 μL
检测波长：240 nm
参考谱图如下。在该色谱体系中，以三聚氰胺计理论塔板数每米可高达180000，如此高的柱效使其非常利于食品中三聚氰胺的测定。

（3）常规方法
针对常规的离子对色谱方法，赛分公司的Sepax GP-C8色谱柱（4.6 mm I.D.×150 mm，5 μm，订货号107084-4615）也非常适合。
a. 色谱条件I：参考中国农业部标准NY-T 1372-2007
色谱柱：Sepax GP-C8（4.6 mm I.D.×150 mm，5 μm）
缓冲液：10 mM柠檬酸，10 mM庚烷磺酸钠
流动相：缓冲液: 乙腈=90: 10 (v/v)
流速：1 mL/min
进样量：10 μL
检测波长：240 nm
参考谱图如下。其中三聚氰胺在8.8 min出峰，拖尾因子1.0，以三聚氰胺计理论塔板数每米可高达80000。

b. 色谱条件II：参考美国食品药品监督管理局（FDA）三聚氰胺检测方法
色谱柱：Sepax GP-C8（4.6 mm I.D.×150 mm，5 μm）
缓冲液：10 mM柠檬酸，10 mM辛烷磺酸钠，调pH为3.0
流动相：缓冲液: 乙腈=85: 15 (v/v)
流速：1 mL/min
进样量：10 μL
检测波长：240 nm

Answer 3

哎，傻孩子，你当三聚氰胺是氯化钠什么的可以结晶然后过滤啊？！
我是质监局专做三聚氰胺检测的，在检测过程中都是有0.22微米的膜过滤以取出杂志的，也就是说，三聚氰胺分子可以通过0.22微米以下的薄膜并且没有损失。
因此，普通的实验条件说具备的薄膜是不具备滤除三聚氰胺能力的。
关于显色剂，我研究不多，但是以我说知道的，似乎没有可以使三聚氰胺直接显色的试剂，否则我们也不需要花打成本用高效液相色谱或者液质联用来车三聚氰胺了。
总之，劝你放弃你的想法，如果有什么问题你可以到相应的质检部门要求帮助，如果你是相关专业的学生，也可以想办法去相应部门实习以...........

参考资料：原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》(GB/T22388-2008)

Answer 4

（1）SPE柱的活化：取Sepax-UCT DBX产品（60 mg / 3 mL，产品订货号 SSDBX063），依次用甲醇3 mL和水3 mL冲洗。
（2）上样：取上述样品溶液3 mL加入SPE柱的顶端。液滴的流速控制在1 mL/min以内。
（3）洗涤：用水3 mL和甲醇3 mL进行冲洗，抽近干。
（4）洗脱：用5 mL含5 %氨水的甲醇进行冲洗，收集洗脱液，在50℃下用氮气吹干，然后加入2 mL流动相溶解。