rt-pcr产物做测序结果有双峰，这个结果就完全不能用了吗?

Question

如题所述

Answer 1

如果是测序结果开始没有问题，后面出现问题，有可能是测序本身的问题，再试试看。如果所有位置都有双峰，那问题比较倾向于实验本身的问题，还要看你实验目的是什么：如果RT-PCR结果是用来分析基因的表达，那么两种不同片段都被计算在表达量上了，因此就彻底没有什么用了，重新开始吧。如果你是想克隆一个基因或者一个基因片段，那么没有关系，把RT-PCR扩增的片断纯化后装到任何一个载体里面，转化大肠杆菌，获得阳性克隆。按照概率，其中一部分应该是你需要的目的基因，酶切后进行测序鉴定，找出你需要的克隆就可以了。