大肠菌群检测之十倍系列稀释的实验步骤？

Question

如题所述

Answer 1

大肠菌群检测中使用的十倍系列稀释法是一种常见的实验方法，用于确定样品中大肠杆菌的浓度。以下是十倍系列稀释法的实验步骤：
1、准备含有大肠杆菌的原始样品，并将其加入到一瓶含有9毫升无菌蒸馏水的试管中。这个浓度可以是高浓度或低浓度。
2、将试管中的液体混合均匀。
3、取出一毫升（或其他已决定好的体积）混合好的液体，加入到第二个试管中。
4、添加9毫升无菌蒸馏水到第二个试管中，使总体积达到10毫升。这个操作后，将得到一个十分之一的稀释液。
5、从新制备的十分之一稀释液中取1毫升，加入到第三个试管中。
6、添加9毫升无菌蒸馏水到第三个试管中，使总体积达到10毫升。这个操作后，将得到一个百分之一的稀释液。
7、重复以上步骤5和6，每次进行十倍的稀释，直至最终得到需要的浓度（通常不超过1.0×10^4 CFU/mL）。
8、取出合适的稀释液，进行培养和计数。大肠杆菌的生长适宜在37℃条件下进行。
9、将每个稀释液平板化并培养，或者进行膜过滤法。
10、记录每个平板上大肠杆菌的数量，并根据每个试管中的稀释倍数计算样品中大肠杆菌的浓度。
在进行稀释实验时需要使用无菌技术和操作，以避免菌落数的偏差和样品污染。