等点聚焦电泳的溶液配制

Question

如题所述

Answer 1

1. 丙烯酰胺贮液（30%丙烯酰胺，交联度2.6%）：，30g丙烯酰胺和0.8g甲叉双丙烯酰胺溶于H2O，定容至100ml，滤去不溶物后存于棕色瓶，4℃可保存数月。（全班公用）（另一配方为29.1g 丙烯酰胺和0.9g 甲叉双丙烯酰胺溶于H2O，定容至100ml，交联度为3.0%）。
2. 两性电解质Amphline（40%）的加入量为：50ml /ml 胶液。
3. 过硫酸胺：配成1mg/ml的浓度，当天配制，配100ml全班公用。胶液中的加入量为0.5mg/ml胶液。
4. TEMED：胶液中的加入量为1ml/ml胶液。
5. 蛋白质样品：选用两种等电点相差较大的蛋白质，每根垂直管中每种蛋白质的加样量控制在<100mg。蛋白质样品配制成各为5mg/ml的浓度。配2.5ml全班公用。
6. 固定液：10%的三氯乙酸，每组配50ml。
7. 阳极电极液：0.1M H3PO4
3.4ml 浓磷酸（85%）加H2O至500ml，每个电泳槽用500ml。
8. 阴极电极液：0.5M NaOH
2g NaOH 加H2O溶解至500ml，每个电泳槽用500ml。