细胞消化液的作用

Question

如题所述

Answer 1

胰蛋白酶（trypsin）溶液
胰蛋白酶是白色或淡黄色粉末，低温干燥保存。主要作用是使细胞间的蛋白质水解，使细胞离散。其活性以其消化酪蛋白的能力进行测定。常用1:250（1:500）方法表示，即1份胰蛋白酶可以消化250份（或500份）酪蛋白。
胰蛋白酶对细胞的分离作用与细胞的类型和细胞的性质关系密切。不同细胞系对胰蛋白酶溶液的浓度、温度和作用时间等的要求也不相同。
无钙镁离子的平衡盐溶液（常用于配制胰蛋白酶溶液或用于洗涤细胞）
NaCl 8g
KCl 0.20g
KH2PO4 0.02g
Na2HPO4 0.073g
葡萄糖 2.00g
酚红 0.02g
溶于1000ml水中
染色体的G带核型实验中胰蛋白酶用生理盐水配制。

二、EDTA溶液
又称versene，一般用其钠盐，因可溶性较好。有些组织需要Ca2+、Mg2+来保持其完整性，用EDTA来排除这些离子，可使细胞之间裂解，以分散细胞。其作用比胰蛋白酶缓和。使用浓度为0.02%，以无钙、镁的平衡盐溶液配制。
实验室内常将胰蛋白酶和EDTA联合使用。可提高消化效率，细胞分散情况改善。
EDTA不能被血清抑制，所以消化后必须彻底清洗。
EDTA对成纤维细胞作用差。
三、胶原酶溶液
1．用Hank's液配制成2000U/ml
2．36.5度搅拌溶解1h，4度过夜
3．滤过消毒
4．分装成等份使用（1-2周内）
5．长时间贮存在-20度

Answer 2

Leagene无酶细胞消化液(Non-enzy Cell Detach Solution)不含胰蛋白酶等蛋白消化酶类，但能有效地使贴壁细胞与培养瓶皿表面脱离而达到分离细胞目的。其特点是：1、作用温和；2、对细胞的损伤和破坏极小，不影响细胞生物学特性，是肿瘤细胞的极好细胞脱壁方法；3、可以在血清存在的情况下进行消化。消化后的细胞可进行传代培养，亦可用于提取核蛋白和胞浆蛋白、Western Blot、免疫共沉淀等实验，通常室温下就可以消化下大多数贴壁细胞，该消化液适用于消化肿瘤、脑、肝、肾、肺组织等，尤其适用于上皮组织。