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用PCR鉴定后再用酶切鉴定,但是前后结果不一致是什么原因?
如题所述
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推荐答案 2019-12-09
酶切鉴定需要培养大肠杆菌,抽提质粒后才能进行。缺点是耗时,优点是结果可靠。菌落PCR只需用接种针或小枪头蘸一下菌落或菌液,再接入PCR体系中,通过PCR即可判断目标条带的存在。优点是获得结果快,缺点是可能有假阳性。
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第1个回答 2019-12-09
两种鉴定:肯定是两种结果,不过大体上还是一致的,差异不会怎么大。
相似回答
pcr
扩增出的片断正确但双
酶切结果
却偏大
,不
只是为
什么??
请高手指点...
答:
可能是质粒在转菌后部分碱基出现错配或者突变导致你酶切的位置发生变化
。因为你pcr扩增只是你引物的位置只要不突变就可以正常扩增。建议你做个测序。
自己设计的基因导入到载体后,扩增完成
,用PCR
检测和双
酶切
检测成功
,但是
...
答:
如果
再不是
的话那就说明你的这段序列不是保守序列
为
什么PCR
胶回收产物条带大小差不多,到时双
酶切
后条带变大了
答:
PCR
产物是双链线性分子,不存在质粒的三种形态。双酶切后分子形态保持
一致,
更不会自连。不知道你跑胶的时候是否点了酶切之前的产物做对照,如果没有,可能是胶浓度的问题,导致条带看上去大小不一。
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