在塞普路斯的海岸，威尼斯勇将奥赛罗与元老的女儿苔丝狄梦娜秘密相爱，却因种族差异而婚事受阻。阴险的旗官伊阿古一心要除掉奥赛罗，他先是误导元老，反而促成了他们的结合。接着，他挑拨离间，散布凯西奥与苔丝狄梦娜的流言，并伪造定情信物，使奥赛罗深信不疑，愤怒之下误杀了妻子。
第一幕，雷电交加的傍晚，奥赛罗胜利归来，与黛斯德莫娜一同登岸。罗德利果嫉妒奥赛罗的妻子，伊阿古利用酒宴挑起争斗，奥赛罗惩处了凯西奥，而黛斯德莫娜与奥赛罗在夜幕下唱出爱的二重唱，回城堡的路上，他们的爱情已笼罩在疑云之下。
第二幕，城堡内，伊阿古精心策划，挑拨奥赛罗怀疑卡西欧与黛斯德莫娜。奥赛罗在伊阿古的煽动下，对妻子的忠诚产生怀疑。黛斯德莫娜为卡西欧求情，却无辜遭受丈夫的误解，手帕成为伊阿古陷害的工具。奥赛罗决心报复，誓言清除这对“不忠”的人。
第三幕，威尼斯使者到来，宣布奥赛罗将被召回，卡西欧接任。在误会中，奥赛罗对黛斯德莫娜失去理智，命令伊阿古准备毒药或勒死她。特使的到来揭示了残酷的事实，奥赛罗痛苦崩溃，最终陷入昏迷。
第四幕，黛斯德莫娜在卧室里唱着《杨柳之歌》，向圣母祈求。奥赛罗回来后，误以为她不忠，残酷地勒死了她。爱米莉亚揭露伊阿古的阴谋，奥赛罗悔恨交加，最终在妻子的床边自杀，结束了这场悲剧。
《奥赛罗》是莎士比亚的四大悲剧之一，是莎士比亚大约于1603年所写作的。目前所知这出戏最早于1604年11月1日在伦敦的WhitehallPalace首演。