第1个回答 2010-06-14
提取DNA和RNA所用配方是不一样的。
提取DNA配方
CTAB为十六烷基三甲基溴化铵，
CTAB提取缓冲液的经典配方
Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏；
EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性；
NaCl 提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中；
Cβ-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除基因组DNA。
CTAB 4g
NaCl 16.364 g
1M Tris-HCl 20ml( PH8.0)
0.5M EDTA 8ml，先用70ml ddH2O溶解, 再定容至200ml灭菌
冷却后0.2-1% 2-巯基乙醇（400ul）氯仿-异戊醇（24：1）：先加96ml氯仿，再加4ml异戊醇，摇匀即可。
提取RNA配方
2% CTAB（W/V）
2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP（W/V）
100 mM Tris-HCl（pH8.0,DEPC处理的水配置）
25mM EDTA
0.5g/L 亚精胺Spermidine
2.0M NaCl，2%巯基乙醇（V/V，使用前加入）
由于在高温灭菌条件下，Tris-HCl要和DEPC发生反应，所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC 处理的水配制即可。