转基因技术是指将人工分离和修饰过的基因导入生物体基因组中,通过导入基因的表达引起生物体性状的可遗传修饰。这一技术也被称为遗传工程、基因工程或遗传转化,其产物被称为遗传修饰过的生物体(GMO)。
植物转基因的常用方法分为需要和组织培养再生植株的方法和不需要组织培养的方法。需要组织培养再生植株的方法包括:
1. 农杆菌介导转化法:利用土壤中普遍存在的农杆菌,它能够感染大多数双子叶植物的受伤部位并诱导产生冠瘿瘤或发状根。通过改造农杆菌的Ti质粒,将目的基因插入到植物基因组中,并通过细胞和组织培养技术再生出转基因植株。这种方法最初只用于双子叶植物,但现在也扩展到了一些单子叶植物,如水稻。
2. 基因枪介导转化法:通过火药爆炸或高压气体加速,将包裹了目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入植物组织和细胞中。这种方法不受受体植物范围的限制,且载体质粒的构建相对简单,因此在转基因研究中应用广泛。
不需要组织培养的方法是:
3. 花粉管通道法:在授粉后向子房注射含有目的基因的DNA溶液,利用花粉管通道将外源DNA导入受精卵细胞,并整合到基因组中。这种方法由我国学者周光宇提出,其优点在于不依赖组织培养,技术简单,易于掌握。
动物转基因技术主要包括:
1. 显微注射法:在显微镜下,用极细的玻璃针将DNA直接注射到胚胎细胞核内,再将注射过DNA的胚胎移植到动物体内,使其发育成转基因幼仔。这种方法约有十分之一的动物是整合了外源基因的转基因动物。
2. 体细胞核移植方法:先在体外培养的体细胞中导入基因,筛选出带转基因的细胞,然后将这些细胞移植到去核的卵细胞中,形成重构胚胎。重构胚胎移植到母体中,产生的后代百分之百是转基因动物。
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