科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组，得到的重组质粒导入牛的受精卵，使其发育为转基因牛，再

Question

科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组，得到的重组质粒导入牛的受精卵，使其发育为转基因牛，再通过细胞工程培育为转基因克隆牛．pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和5个限制酶切点（如图2）．将重组质粒导入大肠杆菌，并成功地在大肠杆菌中得以表达．请据图回答问题．（1）图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的，图中①过程需要的酶是______．该过程所依据的碱基互补配对原则是______（用字母和箭头表示）．（2）图1中的mRNA是从人体的哪些细胞中获取的？______．（3）重组质粒形成与否需要鉴定和筛选，方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌，通过含抗生素的培养基进行培养，观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断，如图3所示：①如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落，而不能在培养基B上生长、繁殖，则使用限制酶a的切点是图2中的______，即目的基因插入了______中．②如果受体菌在培养基A上不能生长、繁殖形成菌落，而在培养基B上能生长、繁殖，则使用限制酶a的切点是图2中的______，即目的基因插入了______中．③如果受体菌在培养基A和培养基B上都能生长、繁殖形成菌落，则使用限图2中的制酶a的切点是______．

Answer 1

（1）由图可知，①过程是由RNA合成DNA过程，为逆转录过程，需要逆转录酶．RNA中的碱基是A、U、C、G，DNA中的碱基是A、T、C、G，所以配对方式是A→T、U→A、G→C、C→G．
（2）根据题意，生长激素基因是目的基因，该基因表达产物由垂体细胞分泌，所以需要从垂体细胞中提取mRNA．
（3）①根据题意，受体菌能在含青霉素的培养基上生存，不能在含四环素的培养基上生存，所以限制酶切点位于四环素基因内部，由图可知，是切点3、4、5．
②根据题意，受体菌不能在含青霉素的培养基上生存，能在含四环素的培养基上生存，所以限制酶切点位于抗氨苄青霉素基因内部，由图可知，是切点1．
③根据题意，受体菌能在含青霉素的培养基上生存，也能在含四环素的培养基上生存，所以这两个基因都没有被破坏，由图可知，是切点2．
故答案为：
（1）逆转录酶   A→T、U→A、G→C、C→G
（2）垂体细胞
（3）①切点3或切点4或切点5   抗四环素基因    ②切点1   抗氨苄青霉素  ③切点2