第1个回答 2022-08-12
鸟枪法 这种方法类似于鸟枪发射散弹.具体的做法是：用若干个合适的限制酶处理一个DNA分子,将它切成若干个DNA片段.这些片段的长度相当于或略大于一个基因.然后,将这些不同的DNA片段分别与适当的载体结合,形成重组DNA,再将它导入到相应的营养缺陷型细菌中.例如,当我们要提取维生素B1合成酶基因时,就要采用维生素B1的营养缺陷型细菌（它在不含维生素B1的培养基上不能生长）.把整合了不同DNA片段的营养缺陷型细菌分别接种到不含维生素B1的培养基上进行培养,只有那些整合了含有维生素B1合成酶基因的DNA片段的细菌才能正常生长.最后,把这些细菌中的这段DNA分离出来,再进行一系列的操作,就可以获得维生素B1合成酶基因.这种方法的缺点是专一性较差,分离出来的有时并非一个基因,但由于这种方法操作简便,所以现在仍然广泛采用.
反转录法 这种方法是在核糖体合成多肽的旺盛时期,首先把含有目的基因的mRNA的多聚核糖体提取出来,分离出mRNA,然后以mRNA为模板,用反转录酶合成一个互补的DNA,即cDNA单链,再以此单链为模板合成出互补链,就成为双链DNA分子.这种方法专一性强,但是操作过程比较麻烦,特别是mRNA很不稳定、生存时间短,所以要求的技术条件较高.
氨基酸序列合成法 这种方法是建立在DNA序列分析基础上的.当把一个基因的核苷酸序列搞清楚后,可以按图纸先合成一个个含少量（10～15个）核苷酸的DNA片段,再利用碱基对互补的关系使它们形成双链片段,然后用连接酶把双链片段逐个按顺序连接起来,使双链逐渐加长,最后得到一个完整的基因.这种方法专一性最强,现在用计算机自动控制的DNA合成仪,进行基因合成,使基因合成的效率大大提高.但是这种方法目前仅限于合成核苷酸对较少的一些简单基因,而且必须事先把它们的核苷酸序列搞清楚.对于许多复杂的、目前尚不知道核苷酸序列的基因就不能用这种方法合成,只能用前两种方法或其他方法分离或合成.这种合成基因的方法还有一个很大的优点,就是可以人工合成自然界不存在的新基因,使生物产生新的性状以满足人类需求.因此,这一方法今后将随着技术的不断改进而得到越来越广泛的应用.