未导入目的基因之前，质粒上已经有标记基因

那么无论是否导入目的基因，用选择培养基筛选不是都有抗性吗，那还怎么区分重组质粒与普通质粒？

推荐答案 2013-02-28

若目的基因的插入位点位于抗性基因之内，则目的基因插入质粒使得重组质粒相应的抗性基因失活，所以含有重组质粒的宿主细胞不能在含有该抗生素的选择培养基上生长，而普通质粒因抗性基因没有失活，所以含有普通质粒的宿主细胞能在含有该抗生素的选择培养基上生长，这样既可检测出含有目的基因的重组体克隆，这种方法叫插入失活法。追问

如果目的基因的插入位点不在抗性基因之内呢？

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其他回答

第1个回答 2013-03-01

有蓝白斑筛选，又插入片段后可以破坏一个酶，但常见的是PCR鉴定，
另外如果双酶切做的好，T载体质量有保障，没有插入片段的质粒自连是不多的本回答被网友采纳

第2个回答 2013-02-28

做基因型检测啊。。。。。。先得构建质粒，然后把构建好的质粒转到生物里

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标记基因本来就在质粒上,导入不导入目的基因都会产生抗性,怎么筛选有目 ...答：质粒上有多个标记基因，导入目的基因可能把某个标记基因x破坏了，别的标记基因Y没破坏，因此导入目的基因的受体细胞不具有某种抗x的抗性，而具有另外的抗Y的抗性。由此可筛选导入目的基因的质粒。

...检测标记基因的表达就说明受体细胞已导入目的基因呢?答：有标记基因不一定有目的基因，但是在分子学操作中，为了检测目标质粒是否转染入目的细胞中，便在质粒上插入了可以检测的基因，比如荧光基因、某些酶类的基因等等。目前的质粒和工具细胞经过一定的改造，使得重组频率降低（不需要重组的时候），且在筛选克隆时挑取的是单克隆，这样，转染入细胞的质粒基本还是...

标记基因本来就在质粒上,导入不导入目的基因都会产生抗性,怎么筛选有目 ...答：在基因工程中所用的质粒上的标记基因不只一个，人们在加上目的基因时，一般是保留一个标记基因，破坏一个标记基因的方法，这样如果导入的是有目的基因的质粒和不含标记基因的质粒，后代就有办法筛选了。

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