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外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测的结果如何分析
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推荐答案 2012-05-01
SDS-PAGE电泳后,观察空质粒和外源基因的重组质粒在大肠杆菌中诱导表达后产生的蛋白带的差异,然后可以转膜后用外源基因所编码蛋白的单克隆抗体做Western-blot鉴定即可。
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第1个回答 2012-05-01
DNA分子杂交试验,分子杂交,抗原-抗体实验
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重组
菌当中的外源基因
是否
表达
可以通过几个层面进行
分析
答:
将外源基因克隆在含有lac 启动子的表达载体中,让其
在大肠杆菌中表达
。没有加入IPTG
诱导
剂的时候,lacI 产生的阻遏蛋白与lac 操纵基因结合,从而不能进行
外源基因的
转录和表达,而只有表达载体随大肠杆菌的增殖和复制;当加入IPTG后,阻遏蛋白不能与操纵基因结合,则DNA外源基因大量转录并高效表达。
表达的
蛋...
影响
外源基因在大肠杆菌中
高效且活性
表达的
主要因素有哪些
答:
外源基因在
细菌中高效表达,必然影响宿主的生长和代谢,而细胞代谢的损伤,又必然影响外源基因
的表达
。合理地调节好宿主细胞的代 谢负荷与外源基因高效
表达的
关系,是提高外源基因表达水平不可缺少的一个环节。
如何
降低
表达
产物对
大肠杆菌的
毒性
答:
如何降低表达产物对
大肠杆菌的
毒性 1、在摇瓶发酵试验中,在较高的温度下(37、30度)
诱导表达
目的
基因
时,目的蛋白基本以包涵体的形式存在,胞外上清中可溶性的目的蛋白很少,这时菌浓正常,OD600大约有15左右。而在低温(25度)诱导时,目的蛋白大部分依然以包涵体的形式存在,此时胞外上清中可溶部分有...
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外源基因在大肠杆菌中的诱导表达
外源基因在大肠杆菌中表达
外源基因的诱导表达实验报告
外源基因的高效表达
报告基因和标记基因
外源基因
大肠杆菌液体培养
目的基因与载体dna连接的酶
dna提取实验结果分析
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