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外源基因的表达
影响
外源基因表达的
基因主要有哪些
答:
1. 启动子的强弱:有效的转录起始是
外源基因
高效
表达
的关键,因此选择强且可调控的启动子至关重要。2. 核糖体结合位点的有效性:SD序列的存在对原核细胞mRNA翻译起始至关重要。3. SD序列和起始密码子AUG的间距:适当的距离有利于提高翻译效率。4. 密码子组成:避免使用罕用密码子可以提高表达效率。5....
简述
外源基因
在pET
表达
载体中实现表达的基本原理。
答:
在pET表达载体中,
外源基因的表达
受T7噬菌体RNA聚合酶的调控,目标基因被克隆到不为大肠杆菌RNA聚合酶识别的T7启动子之下,在加入T7RNA 聚合酶之前几乎没有表达发生。加入IPTG诱导T7RNA 聚合酶的产生,激活T7启动子,启动转录,进而完成表达。
如何将
外源基因
导入植物细胞并使之
表达
?
答:
【答案】:
外源基因
导入植物细胞并使之
表达
的方法分为载体法和直接法。Ti质粒是一种细菌质粒,它自然存在于一种革兰氏阴性菌——根瘤土壤杆菌的细胞中。根瘤土壤杆菌可感染大多数双子叶植物的受伤部位,使之产生冠瘿瘤。植物产生的这种根瘤细胞与动物的癌细胞相似,它们能独立地、不受控制地生长。根瘤细胞...
举例说明
外源基因
可以在哪几种宿主细胞中的大规模
表达
,各有什么特点...
答:
(1)
外源基因
在大肠杆菌中
的表达
,特点:①大肠杆菌的结构简单;②生理代谢途径较为清楚;③并且易于遗传操作和大规模发酵培养。因此,大肠杆菌已成为高效表达异源蛋白质最常用的原核表达系统。(2)外源基因在酵母中的表达,特点:①基因组简单,易于分析操作;②具有真核生物特有的蛋自质翻译后修饰加工体系,...
外源基因
在真核细胞中
表达
的意义
答:
实现
外源基因的表达
和调控。外源基因在真核细胞中表达的意义主要是实现外源基因的表达和调控,以获得具有特定性状和功能的蛋白质或核酸等生物大分子。外源基因表达产物包括蛋白质、多肽、酶、激素、抗体、疫苗等,具有广泛的应用价值。例如,将外源基因导入植物细胞,可以获得抗虫、抗病、抗逆等性状;将外源...
外源基因
在真核细胞中
表达
的意义
答:
1、实现
外源基因的表达
和调控:通过在真核细胞中表达外源基因,可以获得具有特定性状和功能的蛋白质或核酸等生物大分子,这有助于深入了解基因的功能和调控机制,为生物医学、农业、工业等领域提供新的手段和方法。2、增强生物的抗性:通过将抗虫、抗病、抗逆等外源基因导入植物细胞,可以培育出具有优良性状...
植物如何
表达外源基因
答:
进行亚细胞定位或蛋白互作验证等实验。(一)过
表达
转
基因
植株的创制将目的基因导入植物细胞(特指稳定表达系统)通常可通过农杆菌介导法、花粉管通道法、基因枪法、显微注射法等进行,其中,农杆菌介导法是较常用的遗传转化方法,另外,单子叶植物也可用基因枪法,绿色开花植物可采用花粉管通道法,因为容易...
简述
外源基因
在大肠杆菌中高效
表达
的基本原理
答:
外源基因
在大肠杆菌中高效
表达
的基本原理,包括:强化蛋白质生物的合成(拷贝数、转录水平、mRNA 的翻译控制)、抑制蛋白质产物的降解、维持和恢复蛋白质特向异性空间构象三方面。将外源基因导入生物体的过程称为转化。这可以自然发生,也可以人为发生。人工转化转染方法包括:化学方法,有磷酸钙沉淀法、DEAE ...
外源基因
在原核细胞中
表达
时蛋白质的存在形式有哪些?
答:
1. 游离蛋白质(Free proteins):外源基因被转录和翻译后,产生的蛋白质可以以游离的形式存在于细胞质中。这些蛋白质可以执行其特定的功能,例如催化化学反应、结合DNA或其他分子等。2. 融合蛋白质(Fusion proteins):有时,在
外源基因表达
时,可以将外源基因与宿主细胞中的其他蛋白质基因进行融合,生成...
外源基因表达
的检测是什么?
答:
检测外源基因是否转化成功,首先对报告基因进行检测,然后再进行目的外源基因的检测。目的
外源基因的表达
可分转录和翻译两个水平,转录是以DNA为模板合成mRNA的过程,翻译则是指以mRNA为模板翻译成蛋白质。目的基因表达检测亦可在两个水平上进行,在转录水平上对mRNA进行检测,在翻译水平上对蛋白质进行检测。1...
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