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放射性标记探针检测方法
探针有哪些类型?
探针标记
有哪些
方法
答:
探针标记方法有:随机引物标记、切口平移法、末端标记法
。切口平移是切口产生3'羟基和5'磷酸基团,DNA延伸合成3'端,5'端被小片段降解,缺口位点沿着双链向3'端移动,是在体外向DNA分子引入放射性标记核苷酸的技术。随机引物合成是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。末端标记...
如何用
放射性标记
核酸
探针
从基因文库中筛选目的重组菌
答:
生物素标记的DNA探针用什么方法检测
以病原微生物DNA或RNA的特异性片段为模板,人工合成的带有放射性或生物素标记的单链DNA片段,可用来快速检测病原体.怎么检测
:将一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或荧光染料等标记后制成的探针.可与固定在硝酸纤维素膜的DNA或RNA进行互补结合,经放射自显影或...
分子杂交技术核酸
探针标记
法
答:
切口平移法通过E.coli
DNA聚合酶将放射性核苷酸掺入DNA链,产物比活性受多种因素影响,如核苷酸掺入程度和酶的质量。所需材料有DNA模板、未标记dNTP、特定酶等。操作步骤包括配比混合、水浴反应、终止反应及沉淀回收探针。随机引物合成法利用Klenow酶合成DNA探针,其产物长度和比活性取决于反应条件,如模板...
高中生物中
放射性
同位素
标记
法实验有哪些?都是什么?详细
答:
在目的基因的检测与鉴定中,采用了DNA分子杂交技术
。将转基因生物的基因组DNA提取出来,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作标记,以此为探针使之与基因组DNA杂交,如果显示出杂交带,就表明目的基因已导入受体细胞中。另外,还可采用同样方法检测目的基因是否转录出了mRNA,不同的是从转基因生物中提...
northern杂交
探针
用什么
标记
答:
1、同位素标记:放射性同位素标记是最传统的标记方法
,
通过放射自显影或磷屏成像技术
来检测标记探针与目标RNA分子杂交后的位置和强度。2、非放射性荧光标记:非放射性标记包括荧光素(如Cy3、Cy5等)标记,标记方法更为安全,可实现高灵敏度和多重检测,通过荧光显微镜或扫描仪能快速准确地对杂交结果进行...
荧光原位杂交技术释义和特点
答:
FISH技术的特点主要体现在
探针标记方式
上,分为放射性标记和非放射性标记,如荧光标记。
放射性标记探针
如同位素,虽然对样品要求较低,通过延长曝光时间可提高灵敏度,但存在探针不稳定、显影时间长、空间分辨率低以及操作复杂等问题。相比之下,荧光标记系统的FISH技术则克服了这些缺点,具有经济、安全的优势...
探针
的
标记方法
有哪些?
答:
长片段探针(数百核苷酸)能提供精确的鉴定结果,而人工合成的短片段探针(如20至30个核苷酸)可能导致准确性下降。非
放射性标记探针
,如碱性磷酸酶标记或生物素标记的探针,正在推动分子杂交在临床医学中的广泛应用,减少放射性物质的使用,提高了
检测
的便利性和安全性。
常见于
标记
核酸
探针
的
放射性
核素有?
答:
1.核素标记物
放射性
核素是目前应用最多的一类
探针标记
物.放射性核素的灵敏度极高,可以
检测
到10-14~10-18克的物质,在最适条件下可以测出样品中少于1000个分子的核酸含量.常用标记核酸探针的核素有32P、3H、35S,在Southern印迹杂交中以“P最常用.还应根据
标记方法
的不同选择相应标记方位的核素,一般...
如何
检测
酒精中的芽孢
答:
PCR
检测
法、放射性检测法。1、PCR检测法:使用特定的引物和荧光
探针
对芽孢的DNA进行扩增和检测,具有高灵敏度、高特异性和快速等优点。2、放射性检测法:对样品进行
放射性标记
,通过检测样品辐射水平的变化来检测芽孢的存在。
EMSA实验步骤
答:
1)曝光或者成像时间过长。2)封闭时间不足或者效率不高。3)洗涤效果不佳。4)实验过程中膜没有一直处于湿润状态。使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三种波长四款紫外交联仪,主要包括VL-1000A系列紫外交联仪(365nm)、VL-1000B系列紫外交联仪(302nm)、VL-1000C系列紫外交联仪(254nm...
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