33问答网
所有问题
当前搜索:
标记基因筛选重组细胞的步骤
重组基因筛选的
具体做法是?
答:
先通过限制性内切酶把目的基因和标记基因切出黏性末端然后用DNA连接酶连接到具有相同黏性末端
(用同种限制性内切酶切)运载体(一般是质粒后灭活病毒)将它们导入受体细胞。抗性基因,抗生素基因等都在质粒上,关于目的基因的进入会破坏原有的质粒基因一说,不能赞同。能使基因失活的是限制性内切酶把基因从中...
如何构建和
筛选基因
工程
细胞
答:
进行基因操作一般要经历四个基本步骤,也就是基因操作的“四步曲”。
提取目的基因 基因操作的第一步,是取得人们所需要的特定基因
,也就是目的基因(如图)。如前 面提到的苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因,还有植物的抗病(抗病毒、抗细菌)基因、 种子的贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等,都是目的基因。 ...
请问 标志
基因
为什么能
筛选
目的基因已注入受体
细胞的
细胞,
过程
是怎样的...
答:
标志基因一般是某种药物的抗性基因,如抗青霉素基因等。
筛选
时向培养基内加入该抗性基因抗的物质,则目的基因已注入受体
细胞的
细胞表达该抗性基因,不会死亡,而为注入
基因的
细胞则因为药物而死。
如何
筛选
真正获得目的
基因
并能有效表达的
重组
子
答:
标记基因和目的基因是连在一起的。用
标记基因筛选
基因载体的方法很简单,在表达载体上一般有两个甚至两个以上的标记基因,比如,一个是抗青霉素的基因,一个是抗四环素的基因,将目的基因插入到抗四环素的基因中,那这个表达载体就不能表达出抗。筛选原则是:在什么受体
细胞
中表达,就用什么受体受体细胞内...
标记基因
答:
第二,基因工程的过程是这样的。
我们将目的基因与含有标记基因的质粒用同一种限制性核酸内切酶进行切割,然后将它们混合,使之成为重组质粒
,即同时含有标记基因与目的基因的质粒。当然这步也会出现原来的质粒自己和自己的两端重新结合的状况。然后我们将这些质粒导入到受体细胞中去。比如说标记基因是抗青霉素...
标记基因
如何
筛选
?抗性的基因不本来就在质粒上吗?
答:
是根据
标记基因
表达的性状进行
筛选
,如导入的
重组
质粒上有抗青霉素基因,则将转
基因细胞
放在含青霉素的培养基上培养,如果能生长,则是导入重组质粒的,如果不生长,则可能没有导入重组质粒。
基因重组
技术的基本
过程
答:
①从基因文库中获取(基因组文库,部分基因文库)②利用PCR技术扩增目的基因(变性,复性,延伸)③通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成 2.基因表达载体的构建(基因工程的核心)基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、
标记基因
3.将目的基因导入受体
细胞
4.目的基因的检测与鉴定 ...
怎样检验载体是否进入受体
细胞
?老师讲的是
标记基因
,具体
步骤
是什么?
答:
在原核克隆
过程
中:最常用的是抗性
筛选
:载体上具有某种或某几种抗生素抗性
基因
,转化之后涂布在含有该抗生素的平板上,能长的就是载体进入了的
细胞
。挑选之后可以再利用菌落PCR或者扩增之后酶切,以鉴定目的基因是否也
重组
进去了,以排除载体自连的空载。最后用测序的方法检测是否有突变产生。还有蓝白班筛选...
如何用
标记基因
检测目的基因导入载体
答:
因为标记基因和目的基因同位于运载体上,要导入都导入,要表达则都会表达。检测分三种,首先是通过对
标记基因的
检测,通常用DNA分子杂交技术,来检验标记基因是否成功的导入受体
细胞
。或者用分子杂交技术,来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验,来验证导入基因是否成功表达。
将目的
基因
导入受体
细胞
此
步骤
该如何检测?
答:
目的基因是要有特殊的
标记基因的
,导入受体
细胞
才能检验目的基因是否导入成功,如某段目的基因的抗青霉素的特性就可以用青霉素来检验。满意请采纳!
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜
标记基因怎么筛选重组DNA
标记基因怎么筛选目的基因
重组子鉴定的基本步骤包括
简述重组体筛选的步骤
重组子的构建筛选和鉴定
如何筛选导入目的基因的质粒
重组体筛选和鉴定的作用
目的重组子的概念
重组体鉴定的作用