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核酸探针标记物的种类
核酸的标记物有哪些
答:
(3)荧光素:如FITC、罗丹明类等
,可以发出紫荧光进行观察,主要适用于细胞原位杂交。(4)化学发光探针:一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象,通过化学发光可以像核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。化学发光探针可能是今后非
核素标记物
研究的主要方向。
常见于
标记核酸探针的
放射性核素有?
答:
放射性核素是目前应用最多的一类探针标记物.放射性核素的灵敏度极高
,可以检测到10-14~10-18克的物质,在最适条件下可以测出样品中少于1000个分子的核酸含量.常用标记核酸探针的核素有32P、3H、35S,在Southern印迹杂交中以“P最常用.还应根据标记方法的不同选择相应标记方位的核素,一般情况下,大多数标记...
原位杂交组织化学技术的二、
核酸探针的
应用
答:
1.按所带标记物,
探针可分为同位素标记探针和非同位素标记探针两大类
。目前,大多数放射性标记法是通过酶促反应将标记的基因掺入DNA中,常用的同位素标记物有3H、35S和32P。同位素标记物虽然有灵敏性高,背景较为清晰等优点,但是由于放射性同位素对人和环境均会造成伤害,近来有被非同位素取代的趋势。非...
核酸探针的种类
答:
可将核酸探针分为基因组DNA探针、cDNA探针、RNA探针和人工合成的寡核苷酸探针等几类
。作为诊断试剂,较常使用的是基因组DNA探针和cDNA探针。其中,前者应用最为广泛,它的制备可通过酶切或聚合酶链反应(PCR)从基因组中获得特异的DNA后将其克隆到质粒或噬菌体载体中,随着质粒的复制或噬菌体的增殖而获得...
分子杂交
的方法
答:
核酸探针标记:核酸探针根据核酸的性质,
可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针
;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于...
分子杂交
技术的
核酸探针标记
法
答:
核酸探针根据核酸的性质,
可分为DNA和RNA探针
;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。 分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广...
分子杂交
技术
核酸探针标记
法
答:
核酸探针类型多样,
包括DNA和RNA探针
,以及放射性标记和非放射性标记,单链与双链,均匀标记和末端标记。其中,双链DNA探针在基因鉴定和临床诊断中应用广泛。双链DNA探针标记方法主要有切口平移法和随机引物合成法。切口平移法通过E.coli DNA聚合酶将放射性核苷酸掺入DNA链,产物比活性受多种因素影响,如...
核酸探针的
标志性特征是什么
答:
核酸探针的
标志性特征是有同位素或非同位素
标记物
。
为什么荧光原位杂交实验中细胞核非特异性吸附
答:
探针的种类按所带标记物可分为同位素标记探针和非同位素标记探针两大类
。常用的同位素标记物有3H、35S、125I和32P,非同位素标记物中目前最常用的有
生物素、地高辛和荧光素三种
。探针的种类按核酸性质不同又可分为DNA探针、cDNA探针、RNA探针和合成寡核苷酸探针。探针的荧光素标记可以采用直接和间接标记的...
普通DNA Marker能被生物素/DIG
标记
吗?
答:
解释例如,对于生物素
标记
,可使用生物素-蛋白A(Biotin-Protein A)复合物或生物素-11-UTP等试剂盒进行DNA标记;对于DIG标记,则可使用DIG-11-dUTP或DIG-11-dUTP+DNA Pol I等试剂盒进行标记。标记完成后,将DNA Marker与
探针
(如荧光素探针或辣根过氧化物酶亚硫酸酯探针)结合,即可进行
核酸
检测。需...
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