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wb电泳液和转膜液配方
WB
蛋白
电泳
实验步骤,液体的配置及相关问题解答
答:
1. 试剂配置与选择
电泳液
: 以100ml为基准,准备Tris 3.03g, 甘氨酸 18.8g, SDS 1g。
转膜液
: Tris 3.03g, 甘氨酸 14.4g, 800ml ddH2O和200ml甲醇混合。TBST(10×): Tris 12.1g, NaCl 40g, 500ml ddH2O。2. 实验步骤详解a.
配制
和制胶使用雅酶配胶盒,根据样本选择胶浓度:7.5%(30kD...
求western blot
电泳液和转膜
缓冲液的
配方
~~谢谢啦~~ 有的转移缓冲液加...
答:
5*SDS-PAGE
电泳
缓冲液 0.125M tris 15.1g, 1.25M glycine 94g,0.5% SDS 5.0g,加入800ml去离子水,搅拌溶解。加去离子水将
溶液
定容至1L后,室温保存。用的时候稀释成1*的就可以了。
转膜
缓冲液的
配制方法
:39mM glycine 2.9g,48mM tris 5.8g, SDS 0.37g 加入600ml去离子水,充分搅拌溶...
急求western blot
电泳液和转膜液
的
配方
在哪里可以购买?
答:
10×SDS-PAGE
电泳液
缓冲液(1L)Tris(MW121.14) 30.3g 甘氨酸(MW75.07)144.1g SDS 10g 或10%的SDS贮液100ml 蒸馏水 至1000ml 半干
转膜
缓冲液 Tris(MW121.14) 3.03g 甘氨酸(MW75.07)14.4g 甲醇 200ml 蒸馏水 至1000ml 甲醇要在加部分水后再添加,最后加水定容...
western blot
电泳液和转膜液
的
配方
在哪里可以购买
答:
使用时,
直接用双蒸水稀释五倍(100ml缓冲液+400ml双蒸水,混匀,常温保存)
。一般此电泳液可反复使用三到五次,如果发现有明显沉淀或者漂浮时,请丢弃换新的。10×电转液 (1L)所需试剂 : Tris,甘氨酸和SDS 配方: 30.3g Tris 144g 甘氨酸 3.7 g SDS (如有必要可加)。用80...
wb
实验是什么实验?要怎么做呢?
答:
wb
的实验步骤 制样:裂解缓冲液或者超声处理。(使用RIPA裂解液是需按照100:1加入蛋白酶抑制剂)。
电泳
:根据蛋白大小确定合适的PAGE胶浓度,推荐上样量为20-30ug总蛋白。
转膜
:湿转和半干转都可。但在待检测蛋白分子量较大或低内源水平湿转移方法更佳。洗膜:10min/次*3次。封闭:含5%脱脂奶粉的TBST中...
半干
转膜
缓冲
液配方
答:
转膜
缓冲液的
配制方法
为39mMglycine2.9克,48mMtris5.8克,SDS0.37克加入600毫升去离子水,充分搅拌溶解。加去离子水将
溶液
定容至800毫升后,加入200毫升甲醇。室温保存。5乘SDS-PAGE
电泳
缓冲液0.125Mtris15.1克,1.25Mglycine94克,百分之零点五SDS5.0克,加入800毫升去离子水,搅拌溶解。加去...
非变性凝胶
电泳转膜
buffer
配方
是什么?
答:
转移液20×SSC(3mol/L NaCl,0.3mol/L柠檬酸钠.3H2O,Ph为7.0):称取175.3g NaCl,88.2g柠檬酸三水钠,加约800ml超纯水,加几滴浓盐酸调PH7.0,定容至1000ml。
wb转膜
条件公式
答:
wb转膜
条件公式:10% SDS
溶液
(m/v)。将
电泳
后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的...
wb
跑
电泳
跑到什么位置合适
答:
1、SDS-PAGE试剂:见
电泳
实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。3、
转膜
缓冲
液
:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至1000ml。4、0.01M PBS(pH7.4):NaCl 8.0g;KCl 0.2g;Na2HPO4 ...
WesternBlot基本原理及步骤
答:
3、
配制电泳液
、
转膜液
电泳液:15g 甘氨酸+3.02g Tris-Base+1.0g SDS 溶于1000ml ddH2O 转膜液:14.4g 甘氨酸+3.0g Tris-Base+150ml 甲醇溶于850ml ddH2O 4、电泳 (1)拔梳子:垂直将梳子从胶板中取出,排净孔道中的气泡。(2)安装胶板:将胶板安装入电泳槽,倒满电泳液。(3)上...
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