第1个回答 2022-03-10
化妆品安全测试
化妆品安全性评价试验中的鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames)试验、哺乳动物骨髓细胞染色体畸变检测试验、动物骨髓嗜多染细胞微核试验和小鼠精子畸形检测试验介绍。
鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames)试验
大鼠肝微粒体酶(S-9)的诱导和制备
选健康雄性大白鼠体重200克左右,将多氯联苯溶于玉米油中,深度为200mg/ml,一次腹腔注射PCB剂量为500mg/kg体重。
第五天断头处死动物,处死前12小时停食不停饮水。消毒动物皮毛,打开腹腔,取出肝脏后,用0.15mol/LKCL溶液多次冲洗,每克肝脏加0. 15mol/LKC13ml后,用前刀剪碎肝脏,并在玻璃匀浆器中制成肝匀浆,然后在低温高速离心机上,以9000g离心10min,然后分装保存于液氮或-80° C冰箱中。
哺乳动物骨髓细胞染色体畸变检测试验
意义:在动物以不同途径接触受试化学物后,用细胞遗传学的方法检测骨髓细胞染色体畸变率的增加,从而评价受试物的致突变性,进而预测致癌的可能性。
动物选择:选用成年小鼠或大鼠。
剂量选择:选用1/2、 1/5、 1/10、和1/20 LD50剂量为试验组,另设阳性对照和阴性对照各一组,阳性对照组可用苯,剂量为0.15ml/只,阴性对照为溶剂对照。每组5只动物。
染毒方式:可用经口灌入的方式,共染毒两次,间隔24小时,于二次给药后6小时处死动物,于处死前 4小时腹腔注射秋水仙素(按剂量4mg/kg).
动物骨髓嗜多染细胞微核试验
研究化学物诱发哺乳动物染色体畸变的方法很多,微核试验以其简便、快速、具
有一定的敏感性,被广泛用于遗传毒理学研究中。
目的
该试验是一种用体内试验来检查骨髓细胞染色体畸变的方法,特别适用于检出纺锤体的部分损害而出现的染色体丢失或染色单体的无着丝点片段
实验动物和剂量分组
小白鼠是微核试验的常规动物,也可选用大白鼠,一般常用体重为25~30g的小鼠或体重为150~200g的大鼠,雌雄皆可,每个剂量组至少5只动物,另外设溶剂对照组和阳性物组。常用环磷酰胺做为阳性对照物。
根据受试物理化性质(尤其是水溶性脂溶性),确定受试物所用的溶剂,常用水、植物油(玉米油等)或吐温-80等溶济。剂量的选择是很重要的,用药量太低,会漏掉阳性物,用药量太大,可致动物死亡,或因对骨髓毒性作用太强,致使嗜多染红细胞受到抑制,难以获得正确的结果。一般取受试物 LD50的1/2、 1/5、1/10、 1/20等剂量,以求获得微核的剂量一反应关系曲线。