皂苷的检测方法

如题所述

本方法适用于功能性食品中总皂苷的测定

  本方法人参皂苷Re的低检出量为2μg/mL

  一、方法提要

  样品中总皂苷经提取、PT—大孔吸附树脂柱预分离后,在酸性条件下,香草醛与人参皂苷生成有色化合物,以人参皂苷Re为对照品,于560nm处比色测定。

  二、仪器

  1.722分光光度计。

  2.PT—大孔吸附树脂柱(河北省津杨滤材厂)。

  3.超声波振荡器。

  三、试剂

  1.甲醇(分析纯)

  2.乙醇(分析纯)

  3.人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检定所)

  4.5%香草醛溶液:称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至l00mL

  5.高氯酸(分析纯)

  6.冰乙酸(分析纯)

  7.人参皂苷Re标准溶液:称取人参皂苷Re标准品20.0mg,用甲醇溶解并定容至10mL,即每1mL含人参皂苷Re2.0mg

  8.重蒸水

  四、测定步骤

  1.样品处理:

  (1)固体样品

  称取1.0g左右样品于100mL烧杯中,加入20~40mL 85%乙醇,超声波振荡30min,再定容至50mL,摇匀,放置,吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣,进行柱分离

  (2)液体样品

  含乙醇的酒类样品:准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中,蒸干,用水溶解残渣,用此液进行柱层析;非乙醇类液体样品:准确吸取1.0mL样品(如浓度高或颜色深,需稀释一定体积后再取1.0mL)直接进行柱分离

  2.柱层析

  以PT—大孔吸附树脂柱进行层析分离,准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱,用15mL水洗柱,以洗去糖分等水溶性杂质,弃去洗脱液,再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,于水浴上蒸干,以此作显色用
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