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荧光原位杂交探针设计
如何
设计
特异性
荧光原位杂交探针
答:
1.
探针
分为好多种,你要先决定你用何种,是RNA探针还是DNA探针,杂交时,RNA-RNA结合的稳定性要比DNA-RNA好,所以RNA探针具有结合牢固、背景低等优点;DNA探针背景稍微深一些,不过也可以,标记方法比前者简单一些,另外还有寡核苷酸探针,此类探针分子量小,通透性好,但就是标记的敏感性不高。2.
原位
...
探针设计
教程-如何设计
原位杂交
的探针
答:
如何
设计原位杂交
的
探针
1.探针分为好多种,你要先决定你用何种,是RNA探针还是DNA探针,杂交时,RNA-RNA结合的稳定性要比DNA-RNA好,所以RNA探针具有结合牢固、背景低等优点;DNA探针背景稍微深一些,不过也可以,标记方法比前者简单一些,另外还有寡核苷酸探针,此类探针分子量小,通透性好,但就是标记的敏感性不高。 2.原...
荧光原位杂交
(FISH)是什么,怎么做?
答:
探针
的
荧光
素标记可以采用直接和间接标记的方法。间接标记是采用生物素标记DNA探针,
杂交
之后用藕联有荧光素亲和素或者链霉亲和素进行检测,同时还可以利用亲和素-生物素-荧光素复合物,将荧光信号进行放大,从而可以检测500bp的片段。而直接标记法是将荧光素直接与探针核苷酸或磷酸戊糖骨架共价结合,或在...
探针设计
在线-如何实现
原位杂交
之探针设计
答:
PrimerD'Signer1.1免费的引物设计辅助软件,专门用于pASK-IBA和pPR-IBA表达载体,简化引物设计工作。 ArrayDesigner4.25DemoDNA微阵列(microarray)软件,批量设计DNA和寡核苷酸引物工具。 BeaconDesigner7.80Demo实时
荧光
定量PCR分子信标(Molecularbeacon)及TaqMan
探针设计
软件。 NetPrimerJAVA语言写成的免费引物设计软件,用IE打开运行。
原位杂交
的
探针
包括哪些
答:
通过随机引物标记法掺入
荧光
素标记的dUTP制备DNA
探针
。荧光素标记的dUTP也可通过切口平移法和PCR反应掺入DNA探针。②寡聚核苷酸探针。于寡聚核苷酸3′端加上一段由荧光素标记的dUTP短尾便成探针。反应产生的短尾具有较高灵敏度而又不影响
杂交
的严格性。③RNA探针。通过使用RNA聚合酶和含有对RNA聚合酶专一...
怎么
设计原位杂交探针
啊
答:
2.
原位杂交
相比免疫组化,定位相对准确,但如果蛋白在间质中发挥作用,原位杂交就检测不出来了,结合图像分析,原位杂交也可以对目的基因的转录半定量。3.首先是标本对照,这个包括阳性对照和阴性对照;第二个是
探针
对照,主要是明确探针的特异性;第三个是探针正义连阴性对照,第四个未标记探针竞争抑制;...
荧光原位杂交
技术的简介
答:
1987年,染色体
原位
抑制
杂交
法的创建,使FISH技术得以迅速发展。随后,Cremer等用生物素和汞或氨基乙酰
荧光
素等非放射性物质标记
探针
,创立了双色FISH技术。1990年,Nederlof等用3种荧光素成功探测出了3种以上的靶位DNA序列,从而宣告了多色FISH技术的问世。FISH技术是一种非放射性分子遗传学实验技术,其...
组织
原位杂交
用于原位杂交的
探针
答:
原位杂交
中的
探针
选择是关键步骤。常用的探针类型包括单链和双链DNA,以及RNA。探针的理想长度通常在100到400核苷酸之间,然而,研究表明,更短的寡核苷酸探针(16-30 nt)因其能自由穿透细菌和组织细胞壁,从而提高了杂交效率。因此,寡核苷酸探针和通过不对称PCR标记的小DNA探针或体外转录标记的RNA探针,...
原位杂交的
荧光原位杂交
答:
荧光原位杂交
(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,
探针
首先与某种介导分子(reporter molecule)结合,杂交后再通过免疫细胞化学过程连接上荧光染料[1,2]...
什么是
荧光原位杂交
?有什么用?
答:
FISH的基本原理是用
荧光
标记的单链核酸为
探针
,与待检材料中未知的单链核酸进行特异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。可用荧光标记的探针直接与染色体进行杂交从而对基因进行染色体定位。代表性应用:1、恶性肿瘤和病毒的诊断及鉴别诊断;2、细胞和组织的基因表达;3、完整的
原位杂交
实验解决方案。
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