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原位杂交探针合成
原位杂交
的原理是什么?有何用途?
答:
H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸
探针
,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用放射自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在并定位。用
原位杂交
技术,可在原位研究细胞
合成
某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感...
怎么设计
原位杂交探针
啊
答:
2.
原位杂交
相比免疫组化,定位相对准确,但如果蛋白在间质中发挥作用,原位杂交就检测不出来了,结合图像分析,原位杂交也可以对目的基因的转录半定量。3.首先是标本对照,这个包括阳性对照和阴性对照;第二个是
探针
对照,主要是明确探针的特异性;第三个是探针正义连阴性对照,第四个未标记探针竞争抑制;...
原位杂交
的荧光原位杂交
答:
然后将
探针
直接杂交到染色体或DNA纤维切片上,再用与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合来检测DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的定性、定位、相对定量分析.FISH具有安全、快速、灵敏度高、探针能长期保存、能同时显示多种颜色等优点,不但能显示中期分裂相,还能显示于间期核.同时在荧光
原位杂交
...
组织
原位杂交
的
探针
答:
用于
原位杂交
的
探针
可以是单链或双链DNA,也可以是RNA探针。通常探针操作的长度以100-400nt为宜,过长则杂交率减低。最近研究结果表明,寡核苷酸探针(16-30 nt)能自由出入细菌和组织细胞壁,杂交效率明显高于长探针,因此,寡核苷酸探针和不对称PCR标记的小DNA探针或体外转录标记的RNA探针是组织原位杂交...
荧光
原位杂交
技术的原理
答:
在日常生活中,人们通常广义地把各种微弱的光亮都称为荧光,而不去仔细追究和区分其发光原理。利用荧光染料与被研究对象(蛋白、多肽等)吸附或共价结合后其荧光特性发生改变,从而反映有关研究对象性能的信息。荧光标记染色体的基本原理是通过标记的DNA
探针
与细胞核内的DNA靶序列
杂交
,获得细胞内多条染色体...
技术| 引物和
探针
的制备方法一览
答:
效率与精度的平衡引物和
探针
的长度与性能息息相关。理想情况下,15-20个核苷酸的寡核苷酸能在保持高效杂交的同时,兼顾一致性。过长的探针可能降低纯度,因此在
原位杂交
中,通常选择多个短片段而非一个大片段(图4)。探索与应用的广阔领域寡核苷酸探针因其长寿命、高纯度和成本效益,广泛应用于实时PCR和...
基因组
原位杂交
具体是怎么回事
答:
细胞的
原位杂交
技术 原位杂交(ISH)是一种可在细胞涂片、组织切片以及分裂中期染色体带中检测DNA或RNA的技术,此方法原理是由DNA或RNA的序列与互补的标记单链DNA/RNA
探针
结合形成标记的双链杂交分子,本技术可对组织细胞原位的待测核酸分子进行定性,定量及定位分析。在细胞分化调节、基因定位、肿瘤遗传学、...
免疫组化和
原位杂交
的区别
答:
应用带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸
探针
,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用放射自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的 mRNA或DNA 的存在并定位;用
原位杂交
技术,可在原位研究细胞
合成
某种...
荧光
原位杂交
(FISH)实验操作步骤
答:
其基本原理是,按照两个核酸的碱基序列互补原则,用特殊修饰的核苷酸分子标记DNA
探针
,然后将标记的探针直接
原位杂交
到染色体或DNA纤维切片上,再与荧光素分子偶联的单克隆抗体和探针分子特异性结合,经荧光检测系统和图形分析技术对染色体或DNA纤维上的DNA序列定位、定性和相对定量。试验方法如下:1)玻片处理...
原位核酸分子杂交技术简称
原位杂交
含义是什么?
答:
通过组织化学或免疫组织化学方法在被检测的核酸原位形成带颜色的杂交信号,在显微镜或电子显微镜下进行细胞内定位。1.原位核酸分子杂交技术简称
原位杂交
是应用已知碱基顺序并带有标记物的核酸
探针
与组织、细胞中待检测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合而形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统。2.这...
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